新型样品前理技术在中药制剂分析中的应用.pdfVIP

Classified Index: CODE: 10075 U.D.C.: NO: A Dissertation for the Degree of M.Sc. Applications of New Sample Pretreatment Technologies in the Determination of Traditional Chinese Medicinal Preparations Candidate: Li Zhimin Supervisor: Prof. Shi Zhihong Academic Degree Applied for: Master of Science Specialty: Analytical Chemistry University: Hebei University Date of Oral Examination: May, 2014 摘 要 摘 要 中药制剂成分多样，基质复杂，大大增加了对其分析研究工作的难度。乙腈-水体 系两相分离的技术，操作步骤简单，基质提纯效果好，所需的样品及有机溶剂的体积小， 且分相后的乙腈相可以直接进样用于反相液相色谱分析，是一种简单有效的新型样品前 处理技术。但其在中药制剂分析中的应用还未见报道。本实验的目的和意义就在于将乙 腈-水体系分相的技术应用到中药制剂（以葛根芩连汤和藿香正气口服液为研究对象） 的分析研究中来。本文共分 4 章，主要内容如下： 第 1 章：对中药制剂分析中常见的几种前处理技术进行了简要总结，对新型乙腈- 水体系分相技术及其应用进行了介绍，并概述了本文的选题思想。 第 2 章： 采用高效液相色谱法对葛根芩连片中的 14 种成分进行了分析。色谱柱： Diamonsil C18 柱（150mm×4.6mm，5μm ），流动相：（A ）甲酸- 甲酸铵缓冲溶液（pH=3.2 ， C 甲酸铵 = 20.0 mmol·L-1 ）- （B ）乙腈，梯度洗脱，流速：1.0 mL·min-1；检测波长：254 nm 和 275 nm 。使用乙醇：水（60:40， v/v ）为萃取剂，实现了葛根芩连片中 14 种有效成 分的测定，分析成分在 46 分钟以内全部出峰。方法简单、准确、高效，能对葛根芩连 片的质量进行更加全面可靠的检测和评价。 第 3 章：基于低温下乙腈-水体系分相的技术，建立了低温液-液萃取技术结合 UPLC-MS/MS 测定葛根芩连汤中 12 种有效成分的方法。萃取条件如下：取 3 mL 供试 品溶液 （pH = 5.9 ），用2 mL 乙腈，在 -35℃下冷冻 35 min，分离出的有机相用水稀释 ○ 10 倍后用于 UPLC-MS/MS 检测。分离条件为：色谱柱，Waters ACQUITY UPLCR BEH C18 柱 （2.1×100 mm I.D. ，1.7 μm ）。流动相：（A ）甲酸- 甲酸铵缓冲溶液 （pH = 3.2 ，C 甲 酸铵 = 20.0 mmol·L-1 ）- （B ）乙腈。梯度洗脱。12 种分析物在 10 分钟内全部分离，利用 多反应监测模式（MRM ）进行质谱检测 。本文首次将低温液- 液萃取的方法与 UPLC-MS/MS 方法相结合，利用低温液-液萃取技术大大简化了样品前处理的过程，同 时 UPLC-MS/MS 技术的应用缩短了分析时间，提高了定性的准确度和定量的灵敏度。 两项技术的结合，使分析实验工作变得简单高效。 第 4