MFG-E8的视网膜色素变性过程中小胶质细胞吞噬行为的研究.pdfVIP

摘要 MFG．E8与视网膜色素变性过程中小胶质 细胞吞噬行为的研究 生物化学与分子生物学专业硕士研究生肖明春 指导教师刘堰教授 摘 要 视网膜色素变性(retinitis 失为特征的遗传性视网膜变性疾病，是遗传性视觉损害和盲目的最常见原因。皇 rat，RCS)大鼠是研究视网膜色素变性的经 家外科学院(RoyalCollegeofSurgeon 典动物模型，其视网膜色素上皮细胞(retinal cell，RPE)不能发 pigmentepithelial I的S)不能及时被吞噬，大量堆积于视网膜下腔，从而引起视觉功能障碍，导致 自身生理功能丧失，加重RP的发展。视网膜小胶质细胞在视网膜发育和变性过程 中起“清道夫的作用，清除凋亡细胞。因此，加强小胶质细胞识别、吞噬凋亡 的视杆细胞，可以减轻凋亡细胞对临近组织的毒性作用，维持视网膜微环境的稳 定，从而有效清除堆积在视网膜下腔的ROS，起到保护健康的视锥细胞，保护残 fat 存中心视力的作用。乳脂球上皮生长因子．8(milk factor globuleepidermalgrowth 8，MFG．E8)最早发现由淋巴器官的吞噬细胞分泌，是介导吞噬细胞发挥吞噬功 膜色素变性过程中，视网膜小胶质细胞发挥吞噬功能，是否也有MFG-E8参与， 是否也通过该通路发挥作用，这一涉及神经免疫调节的基础性问题还未有研究者 涉足。如果小胶质细胞吞噬功能的调节确实有MFG．E8的参与，那么外源性加入 MFG．E8有可能加强其吞噬功能，进而保护残存的感光细胞，对治疗RP也具有积 极意义。 本研究的目的：研究视网膜小胶质细胞在RCS大鼠视网膜色素变性过程中的 发育和变性过程中的表达变化规律。方法1)鼠龄为14、35、60、90d的RCS 为14、35、60、90 d的RCS大鼠，采用免疫荧光染色技术标记MFG．E8。3)鼠 龄为14、35、60、90 两南大学硕十学傅论文 lb、 90d的RCS大鼠，荧光实时定量聚合酶链反应(real-timePCR)检测CDl 疫荧光染色显示，鼠龄为14d的RCS大鼠CDllb阳性细胞分布于视网膜的内层， cells 主要为视网膜神经节细胞层(ganglionlayer，GCL)和内丛状层(Innerplexiform nuclear layer，IPL)，在内核层(Innerlayer，INL)可见少量的CDllb阳性细胞。 鼠龄为35d的RCS大鼠CDllb阳性细胞主要分布在视网膜内丛状层，少量细胞迁 移至外核层(Outer d的RCS大鼠CDllb阳性 plexiformlayer，OPL)。鼠龄为60 细胞迁移至外核层，在外核层明显活化。鼠龄为90d的RCS大鼠CDllb阳性细 胞分布于外核层之外，阳性细胞数量较60d少。2)免疫荧光染色显示，鼠龄为14 ceils d的RCS大鼠MFG．E8阳性细胞主要分布于视网膜神经节细胞层(ganglion 层(Inner plexiformlayer，IPL)，少量细胞迁移至外核层(Outerplexiformlayer， OPL)。鼠龄为60d的RCS大鼠MFG．E8阳性细胞迁移至外核层，在