多肽的合成分离纯化及巯基氧化反应研究.pdf

摘要 多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质。自从Merrifield发明固 相法化学合成多肽以来，有关各种活性多肽及蛋白质的化学合成有了很大的发 展。本论文采用Fmoc固相合成方法合成了有药用价值的奥曲肽及其它两种小分 子五肽，并对多肽进行了分离纯化，研究了还原型奥曲肽中巯基的氧化反应。 论文包括以下四个部分： 1．文献综述：简述了多肽的基础知识、多肽合成的发展史、固相合成多肽的原 理，综述了多肽的应用与研究展望、Fmoc固相合成中的耦联方法、色谱在多 肽纯化方面的应用以及形成二硫键的氧化方法。共引用文献94篇。 2．采用Fmoc固相合成法，以苯并三唑四甲基脲四氟硼酸盐、二异丙基乙胺和1一 羟基苯骈三氮唑为缩合剂；苯酚一乙二硫醇一苯甲硫醚一水一三氟乙酸 (5：5：磊鬣≤稳隧≯}VⅣ)为切割试剂，合成了奥曲肽、Phe—Leu—Glu—Olu—Leu及 c，，}巯蠢蠢氧饔舔鬻精；j§幽甜--种,j、分子多肽，并对奥曲肽的合成规模进行 了放大。经姚DI-TOFma酶橙溯，验证了合成产物的正确性。 色谱及MALDI．TOFmass进行了纯度检测，奥曲肽的纯度为97．8％。 4．研究了还原型奥曲肽分子内的一对巯基的氧化对接反应。分别采用空气氧化 法、铁氰化钾氧化法、DMSO氧化法、Cu”氧化法和双氧水氧化法对不同浓 度的还原型奥曲肽进行了氧化实验。从氧化速率及氧化效果的方面考虑，发 现铁氰化钾氧化法和H202氧化法对还原型奥曲肽的氧化效果更优。 关键词： 固相合成，奥曲肽，反相高效液相色谱 Abstract of isatypebioactivesubstancethat inallthecells’ Polypeptide participates function．Theofbioactive and withchemicalmethods synthesis polypeptidesproteins has themethodofMerrifield’Ssolid phase beinggreatlydeveloped，since peptide set this andothertwo were synthesis(SPPS)wasup．In thesis，octreotide peptides Fmoc—SPPS and variousmethods synthesized method，separatedpurified，also by fortheformationofdisulfidebondwithinoctreotidemolecularwere investigated． Thethesisincludesthe four following parts： was 1．At fundamentalon introduced．Thenthe first，the knowledgepolypepride in andthe of methodsSPPS、the history