小分子化合与dna的相互作用及dna生物传感器的研究.pdf

小分子化合物与DNA的相互作用及 DNA生物传感器的研究 摘 要 本论文合成了邻菲咯啉金属配合物，通过X一射线衍射分析测定其结构。利用 电化学方法研究了2，9．二甲基．1，10．邻菲咯啉铜、3．氨基酚嗯嗪及4，4’．二氨基偶氮 苯与DNA的作用机理，确定了最佳反应条件。运用核酸杂交技术，用具有电化 学活性的化合物作为指示剂制备了DNA电化学传感器，用于识别和测定互补的 DNA片断。对电极表面进行修饰，制备成DNA探针，并将DNA探针应用于靶 序列DNA片断的识别。能有效的识别互补的ssDNA片断，具有良好的选择性。 本论文共分为四章： 第一章概述了小分子化合物与DNA的作用方式、研究方法，介绍了DNA 生物传感器的设计原理、分类，综述了DNA生物传感器的研究现状以及适体传 感器的研究进展，重点介绍了DNA电化学传感器的研究现状。 第二章以邻硝基苯胺为原料，合成了邻菲咯啉类化合物并与过渡金属配位， 用元素分析、红外光谱对产物进行了表征，得到2，9．二甲基．1，10一邻菲咯啉铜 键合法制备了DNA生物传感器，同时讨论了扫速、离子强度等对DNA生物传感 器的影响。测定了DNA电化学传感器检测乙肝病毒的检测线性范围为 8．82×10一～8．82×10’7 mol·L～，在此浓度范围内的DNA可定量测定；检测限为 肿瘤药物提供一定的科学研究基础及理论依据。 第三章以邻氨基酚为底物，通过OAP．H202．HI心体系模拟OAP在人血红细 胞中的代谢作用，通过酶促反应制得3一氨基酚嗯嗪纯品。采用各种电化学方法研 究了AP在玻碳电极上的电化学行为及其与鲑鱼精DNA间的相互作用，并以AP 为杂交指示剂，用共价键合法制备了DNA生物传感器。同时讨论了扫速、杂交 时间等对渊A生物传感器的影响。研究了ssDNA中碱基G数量对检测信号的 影响，发现随着碱基G数量的增多，还原峰电流增加。测定了DNA电化学传感 器检测乙肝病毒的检测线性范围为3．53芟10‘一～1．08×lO《lnol·L～，在此浓度范围内 的DNA可定量检测；检测限为1．0×10_mol·L以(S／N=3)。 ’第四章基于偶氮化合物和碳纳米管，运用共价键合法将4，4’．=氨基偶氮苯 (4，4’．DAAB)固定到玻碳电极表面，然后弓l入羧基化多壁碳纳米管，最后将 ssDNA固定到电极上。运用电化学方法研究了4，4’．D丸蠕在玻碳电极上的电化 学行为，通过羧基化多壁碳纳米管的增强作用，利用共价键合法成功的制各了电 化学D】《A生物传感器，同时讨论了缓冲溶液、pH值、杂交时间等对DNA生物 传感器的影响。通过对ssDN～GCE，dsDN～GCE上的微分脉冲伏安行为的比较， 说明本生物传感器有良好的选择性。测定了DNA电化学传感器检测乙肝病毒的 线性范围为7．94×lo堪～1．58×10墙m01·L～，在此浓度范围内的DNA可定量检测； 检测限为1．14×1o-8mol·L-l(S／N=3)。 结论部分，对全文内容进行了总结。 关键词：小分子化合物乙肝病毒碳纳米管DNA生物传感器 ll 0FSMALL STUDIESONINTERACTIoN 螽凄oLECUL嚣SW薹零H DEoXYRIBoNUCLEICACIDANDDNA B至oSENSoR ABSTRACT to interactionbe铆een lnthis wereused p8per，electrocllemie砖met}lodsstudy饿e wi斑s霞粥斓 to sengorswere DNA