徐闻普哥滨珊瑚共附生真菌的活性和代谢产物研究.pdfVIP

徐闻普哥滨珊瑚共附生真菌的活性及代谢产物的研究 摘 要 海洋生物资源是天然药物的重要来源，其中热带珊瑚礁生态系统具有丰富的生 物多样性和化学多样性，尤其是珊瑚共附生微生物，产生的化学防御物质往往具有 良好的药理活性，为药物先导化合物的发现提供了重要资源，引起了天然产物化学、 药理学等领域的广泛关注。 本论文以23 株中国徐闻普哥滨珊瑚共附生真菌为研究对象，筛选出5 株活性菌 株，通过产物HPLC 丰富度分析确定对菌株Fusarium fujikuroi XWC21-13 大规模发 酵，分离、鉴定次级代谢产物，并对化合物的生物活性及菌株发酵条件进行初步研 究。 通过硅胶柱层析、反相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20 柱层析和高效 液相色谱等分离手段从分离自中国徐闻普哥滨珊瑚的一株共附生真菌 Fusarium fujikuroi XWC21-13 发酵液中分离得到4 个化合物。通过解析波谱(UV, NMR, MS) 数据，化合物1 鉴定为大环内酯类化合物(S)-curvularin，化合物2-4 仍在鉴定中。运 用抗肿瘤、抗菌活性模型对化合物1、2 进行活性评价。化合物1 有一定的抑制水产 腐败菌活性，对希瓦氏菌Shewanella sp. SL3 和副溶血性弧菌Vibrio parahemolyticus 的MIC 值均为50 μM。此外，化合物1 对人宫颈癌Hela 细胞具有较强的抑制活性， 其IC50 为26.70 μM ；化合物2 对人宫颈癌Hela 细胞及人大细胞肺癌H460 细胞有抑 制活性，其IC50 分别为55.78 μM 和62.16 μM 。 运用HPLC 定量分析监测代谢产物(S)-curvularin 在不同发酵条件下的产量变化 情况，最终确定Fusarium fujikuroi XWC21-13 最适发酵方式为静置发酵；发酵过程 添加500 μM SAHA ，温度28 ℃，静置发酵29 天，可以使(S)-curvularin 的产量达到 381.4039 μg/mL，产量提高40.86% 。添加500 μM SAHA 的摇床培养（60 rpm ）不 能明显提高(S)-curvularin 产量，但相对静置发酵可以缩短近50%发酵周期。 本文对一株珊瑚共附生真菌进行次级代谢产物分离及活性研究，得到2 个活性 化合物，对水产腐败菌及Hela 细胞显示中等活性，同时通过微生物发酵技术提高产 量，证明添加SAHA 是促进大环内酯类化合物合成的有效策略，为海洋微生物资源 有效利用提供了科学依据。 关键词：普哥滨珊瑚，真菌，次级代谢产物，生物活性，发酵优化 I Studies on The Secondery Metabolites and Their Bioactivies of Porites Pukoensis - Derived Fungi from Xu Wen Abstract Marine bioresources are extremely important for natural drug discovery. Tropical coral reef ecosystem which is rich in biodiversity and chemical diversity, especially their symbiotic microorganisms depend on the chemical defensive substances, makes an important resources for the discovery of drug lead compounds. Recently, more and more attentions are paying in this research field. In this thesis, we have researched on 23 strains Porites pukoensis