场效应辅助提取速逆流色谱联用在中草药有效成分分离纯化中的应用.pdf

场效应辅助提取／高速逆流色谱联用在中草药有效成 分分离纯化中的应用 专业： 分析化学 博士生： 邓建朝 指导教师： 李攻科教授 摘要 中草药有效成分快速高效分离和纯化制备是生产制备中药标准品、对照品生 产的核心，也是中药质量控制和中药现代化的重要组成部分。传统的以溶剂提取 结合柱色谱提取纯化制备中草药有效成分标准品或对照品的方法因步骤繁琐、周 期长、效率较低而无法满足中药现代化生产和质量控制的需要。本论文结合微波 辅助提取(MAE)和加速溶剂提取(ASE)方法具有快速高效的特点，以及高速 ASE／HSCCC方法，直接从岩黄连、朱砂根、肿节风和石吊兰等中草药中分离纯 化得到了高纯度的有效成分对照品，并采用HPLC、MS和1HNMR等技术表征了 有效成分对照品的纯度和结构。主要研究内容如下： 1． 综述了中草药有效成分提取和分离技术的研究进展，重点介绍了微波辅助 提取技术、加速溶剂提取技术和高速逆流色谱技术在中草药有效成分提取 分离纯化中的应用进展。 2． 开展了MAE／HSCCC联用分离制备中草药有效成分的研究。采用MAE提 取、粗提液浓缩后直接进入HSCCC分离纯化，建立了分别从岩黄连和朱砂 根中直接分离纯化脱氢卡维丁和岩白菜素对照品的MAE／I-ISCCC联用方 法。 (1)建立了直接从岩黄连药材中分离纯化脱氢卡维丁的MAE／HSCCC联用方 法，并采用HPLC、MS和1HNMR分析表征了纯化得到的脱氢卡维丁对照 品。通过正交试验优化了MAE提取条件，得到MAE最优条件为：提取温 度60℃、液固比20 rain和微波功率700W。优化得到 m地、提取时间15 mol／LHCl(4：0．5：2， 脱氢卡维丁的HSCCC分离条件为：以氯仿．甲醇．0．5 v／v～)为两相溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，转速为800唧， 流速为2mUmin，最大进样量900 mg粗提物。采用该MAE／HSCCC联用 方法可一次直接从6g岩黄连药材中分离纯化得到纯度为98．9％的脱氢卡维 丁42 h。实现3次连续进样过程，从2700 mg，总耗时4 mg粗提物中共制 备纯度超过98％的脱氢卡维丁122．1 h。 mg，总耗时约12 (2)建立了直接从朱砂根、岩陀和落新妇中分离纯化岩白菜素的MAE／HSCCC 联用方法，并采用HPLC、MS和1HNMR分析表征了其纯度和结构。通过 正交试验优化了MAE提取条件，得到朱砂根的最优条件为：提取温度60 ℃，液固比10 rain和甲醇浓度60％(v／v)；岩陀的最佳 mug，提取时间15 条件为：提取温度50℃、液固比15mug、提取时间5min和甲醇浓度60％ (v～)；落新妇的最优条件为：提取温度50℃、液固比10 m№、提取时间 5 岩白菜素的提取率，MAE使用提取溶剂量少且对中草药有效成分提取效率 较高。优化的岩白菜素的HSCCC分离条件为：以乙酸乙酯．正丁醇．水(3 ：2：5，v／v／v)为溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，转速900硼， 流速2mUmin，一次最大进样量进样160 mg粗提物。采用该MAE／HSCCC 联用方法可一次直接从160