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应用 HSV-TK 系统，研究 ATRA 和 VSV-G 对耐药 AML 细胞的杀伤作用                        中文摘要  中文摘要 急性髓系白血病（AML ）细胞对化疗药物的耐受性是临床上治疗 AML 的一 个主要障碍。近年来，无论是在实验阶段还是临床治疗中，自杀基因疗法已经开 始广泛地用于肿瘤的治疗。 本论文中，我们选用了最常用的自杀基因系统 HSV-TK/GCV 系统，研究了该 系统在杀伤耐受化疗药物的 AML 细胞方面的潜在作用。首先，我们分别筛选了耐 受阿糖胞苷（Ara-C ）和多柔比星的白血病细胞系，在细胞培养过程中证明了 HSV-TK/GCV 系统可以有效地抑制耐受化疗药物的白血病细胞的生长，而且不同 的白血病细胞系对该系统具有相似的敏感性。其次，研究结果证明全反式维甲酸 （ATRA ）的加入可以引起一种重要的间隙连接蛋白Connexin 43 表达水平的上调， 还能在一定程度上增强 HSV-TK/GCV 系统对白血病细胞的杀伤效果。有趣的是， 膜融合蛋白 VSV-G 的加入也可以通过促进白血病细胞间的融合而增强 HSV-TK/GCV 系统的杀伤效应。将稳定表达 HSV-TK 和 VSV-G 的耐药细胞混合培 养后加入 GCV，发现 VSV-G 的表达可以增强 HSV-TK/GCV 系统的旁观者效应。 除此以外，我们还发现 VSV-G 和 ATRA 同时作用于 HSV-TK/GCV 系统可以使其 杀伤耐药 AML 细胞的效果更显著。 综上所述，HSV-TK/GCV 系统可以直接作用于耐受化疗药物的人 AML 细胞， 并且ATRA 和 VSV-G 的使用可以通过增强旁观者效应而有效地提高该系统的杀伤 力。这些结果为 HSV-TK/GCV 系统应用于临床治疗耐药性 AML 奠定了理论基础。 关键词：VSV-G ； ATRA ； 旁观者效应； 耐受化疗药物的白血病细胞； HSV-TK/GCV 作 者：胡晨曦 指导老师：尹 斌     I Abstract ATRA and VSV-G affected bystander killing of chemoresistant leukemic cells by HSV-TK/GCV ATRA and VSV-G affected bystander killing of chemoresistant leukemic cells by HSV-TK/GCV Abstract Refractoriness of acute myeloid leukemia (AML) cells to chemotherapeutics represents a major clinical barrier. Suicide gene therapy for cancer has been extensively investigated both in experimental and clinical settings. In this study, we investigated the potential application of herpes simplex virus thymidine kinase/ganciclovir (HSV-TK/GCV) based system to inhibit chemoresistant AML cells. We first generated Ara-C resistant K562 cells and doxorubicin-resistant THP-1 cells. We found tha