拟南芥FT蛋白FTmRNA的亚细胞定位的研究及其对AP1蛋白稳定性的调控.pdfVIP

摘要 摘要 高等植物的开花过程是一个复杂的过程，期间受到众多因子的调控，如CO， FT，API等。而其中刀和API两个基因在整个开花过程中起着至关重要的作用， 近几年的一些研究表明刀基因产物(mRNA或者蛋白)可以通过长距离运输到 茎尖，并且在茎尖中可以和FD形成复合物调控APl等的表达，进而控制开花。 本实验室王伟等人通过实验证明Fr蛋白和刀mRNA都是开花素的主要成份， 它们二者需要协同运输，单独的FT蛋白或者FTmRNA都不能进行长距离运输， 并且内质网可能参与到了Fr蛋白和刀mRNA的共同运输过程。本研究进一步 研究FT蛋白和刀mRNA在内质网上的定位，以及flr是怎样调控API蛋白质 的稳定性。 首先，本研究以热激诱导刀表达的转基因植株HSP：HA：FZ：3’UTR声10为 对象，利用蔗糖密度梯度离心的方法来研究F1r蛋白和刀mRNA在细胞中的定 位，结果表明FT蛋白和刀mRNA均定位于内质网。在此基础上，本研究进一 步用各种高盐、强碱等试剂来处理提取的微粒体，然后检测FT蛋白和FTmRNA 的分布，发现高盐、强碱都不能使Fr蛋白从内质网膜上解离，证明F1r蛋白定 位在内质网腔中；而FTmRNA在强碱处理后即被解离说明FTmRNA定位于内 质网外侧。所以，FT蛋白和刀mRNA很有可能足通过内质网，协同运输到茎 尖诱导彳尸，的表达而促进开花。本实验进一步证明FT可以调控API蛋白的稳 定性。在358：APl：HA转基因拟南芥植株中可以检测到APl：HA蛋白，但是杂交 到伊JD突变体背景中后却检测不到超表达APl：HA蛋白的积累。利用泛素化抗 体进行检测发现APl蛋白可以被泛素化，因此F1r有可能调控APl蛋白通过泛 素蛋白酶体途径。本研究进一步对API蛋白进行了不同区域的突变，发现只有 当API蛋白的MADS．box区域被删除后，超表达的APl蛋白才能在伊，D背景 中积累起来，因此，MADS-box是API蛋白泛素化的区域。 关键词：Fr：内质网；API；泛素化 Abstract Abstract The of isa thatisregulatedbymany floweringplantscomplecatedprocess andAPl．There’resomedataindicatethatthe ofFT factors,such勰FT,CO product to then and／or distanceformleafapex．And gene(mRNAprotein)maytransportlong FT with factorFDin andactivatethe caninteractanother protein transcription apex offloralmeristem wei’S expression identitygeneAPETALAl似PO．Wangexperiment inourlabshowsthatFT andFTmRNAarethemain of protein may component FT mustmove witheachother．Either orFT florigenandⅡley togetheralong