油污土壤降解细的分离鉴定及生长条件优化.pdfVIP

摘要 摘要 生物修复(尤其是微生物)技术治理石油污染土壤的方法以其费用低、无二次污染 等优点被广泛关注。目前，微生物修复石油污染已经在实验室条件下展开，为生物修复 技术在实践中的应用提供了参考和指导。本研究从大庆油田长期被石油污染的土壤中采 集土壤样品，以原油为唯一碳源筛通过直接分离法选出一组石油烃降解优势菌；选择其 中十株纯种菌作为研究对象，利用16SrDNA全序列分析结合形态学观察和部分生理生 化试验对高效的石油降解菌株进行初步的鉴定并对其最佳的生长条件进行了摸索(pH 值、盐浓度，营养物质)，研究了不同影响因素对微生物生长的影响程度及最佳的水平 组合；最后在实验室条件下，对石油污染土壤的土壤酶活性惊醒测定。研究结果如下： 1、通过对7个石油污染土壤样品的富集培养，挑选出10株长势较好的细菌。分别 命名为15，18，7，9，1l，2l，L，H，X，4。 2、通过形态学观察，部分生理生化分析和16SrDNA全序列分析相结合，初步确定 11菌株鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus sp)， 18菌株为氧化微杆菌氧化微杆菌属(Licrobacterium oxydans)，H为节细菌属 (Arthrobacter sp)，7、9、4、21、L、X菌株均为芽孢杆菌属(Bacillus sp)。若想将各 菌株鉴定到种，还有待进一步研究。 3、(1)单因素法改变初始pH值，盐浓度，N源和P源初步探寻各菌株的最适生长 条件，结果发现：L菌株的最适生长条件为pH=7，盐浓度l％，氮源和磷源分别为 源和磷源分别为NH4Cl和K2HP04。 (2)正交试验是为了探究各种影响因素对菌株生长的影响程度，以寻求适合菌株 生长的最优条件组合。结果显示各菌株的最优条件组合分别为：L菌株是182A384D，H 是1838284B／C，ll菌株是lA2A3A4A。 4、石油污染土壤酶活性的测定结果： · 摘要 (4)土壤酶相关性分析结果显示：转化酶与脲酶极显著正相关，转化酶与多酚氧 化酶呈显著负相关，多酚氧化酶与脲酶之间的负相关性不显著。 关键词石油降解菌生物修复16SrDNA条件优化土壤酶活性 ．II． · Abstract Abstract Bioremediation(in toeliminate particularmicrobial)technology soil埘thitslow-cost is method，no concem．At secondarypollution widespread present, microbialremediationofon hasbeencarriedoutunder conditionsfor pollution laboratory bioremediationin referenceand oilfromthe applicationspractice，providesguidance．The oilfieldhas beencontaminatedsoil Daqing long