玉米凝集素性质其在PGRP筛选中的应用.pdfVIP

微生物学硕士论文 玉米凝集素性质研究及其在PGPR筛选中的应用 捅 要 植物凝集素是一类包含有至少一个能可逆结合单糖或寡糖的非催化区域的糖蛋白。不同 凝集素糖结合专一性不同，可特异识别相关微生物，从而表现出植物根部对植物根际微生物 的选择作用。 。’ 本文以玉米种子为材料，分离纯化出玉米凝集素，对其性质进行了研究；以选择性培养 基从玉米根际土中初筛得到玉米根际固氮菌、解磷细菌、解钾细菌；利用荧光素标记的玉米 凝集素为复筛工具，从玉米根际筛选出了具有玉米凝集素亲和性的固氮菌、解磷细菌和解钾 细菌，并对亲和性菌株进行了包括形态学、生理生化和16SrDNA的初步鉴定。 ． 玉米种子研磨过筛后，经脱脂、磷酸缓冲液浸提、50％硫酸铵沉淀、PBS平衡透析、冷 4B层析，得到较纯的玉米凝集素，产率为 冻干燥后得玉米凝集素粗品。粗品经过Sephrose 0．154mg／g玉米，凝集兔血红细胞的最高效价为1：16。 对玉米凝集素性质进行研究，发现：1)玉米凝集素具有凝血血型专一性，能够在较低 浓度时使兔血红细胞发生凝集，但在任何浓度下都不能使人的A、B、AB、O4种血型的血 红细胞发生凝集；2)玉米凝集素对温度较为敏感，40(2保温10min后，凝集活性与室温相 Mn2+则能够抑制玉米凝集素的凝血活性。 采用Marshall法用异硫氰酸荧光素标记玉米凝集素，经测定，标记后玉米凝集素的凝血 效价较标记前未发生改变，仍为1：16。以选择性培养基从玉米根际土中初筛得到固氮细菌15 株，解磷细菌30株、解钾细菌26株。利用异硫氰酸荧光素标记的玉米凝集素为复筛工具，得 到具有玉米凝集素亲和活性菌株共4株，其中，l株固氮菌，2株解磷细菌，1株解钾细菌，分 别命名为N12、P07、P23、K19。对这4株细菌进行了形态学观察，并对菌株进行了生理生 化及16S 随着现代农业的发展，化肥的滥用造成了农田品质恶化、环境污染等一系列严重问题。 微生物肥料通过微生物自身的生命代谢活动起效，具有肥效高、成本低、对环境无污染等优 点。本文利用荧光素标记的玉米凝集素为复筛工具，筛选出了具玉米凝集素亲和性促生菌株， 可做为玉米专用微生物肥料选育的出发菌株。开发微生物肥料，减少化肥用量，能够有效解 决化肥过多而导致的环境污染问题，获得良好的生态效应和社会效应。 关键词：玉米凝集素；性质；亲和性菌株；鉴定 微生物学硕士论文 玉米凝集素性质研究及其在PGPR筛选中的应用 英文摘要 ofCornLectinand of Characterization toScreen Application BacteriafromCorn Growth—promoting Rhizosphere Kun Supervisor：Prof．Wu MasterCandidate：LiuChi ABSTRACTPlantLectinisdefinedasakindof whichis sugar-proteincomposed ofat leastone binded toa mono-or uncatalysedregion reversiblyspecific lectinwasableto