玉米粗缩病7号色体抗病位点的精细定位.pdfVIP

山东大学硕士论文 玉米粗缩病7号染色体抗病位点的精细定位 中文摘要 玉米(Zea L．)是世界上重要的粮食兼饲料作物，在国民经济中占有非 mays Dwarf 常重要的地位。玉米粗缩病(MaizeRough Disease，MRDD)是一种广泛分 布的病毒性病害，近年来在我国蔓延流行，造成了很大的危害，严重影响了玉米 产量。充分利用已有的抗性资源，定位和克隆粗缩病抗性基因，深入研究抗病机 制是从根本上解决病害问题的有效途径。 本实验室王飞利用掖478×90110的后代将玉米粗缩病的三个抗病位点定位 间的距离为5．8cM。 根据(掖478×90110)F2群体中玉米粗缩病抗病位点的定位结果，本工作选 用了来自抗病自交系90110和感病自交系掖478杂交后代的重组自交系F038141 在6号染色体位点均表现为感病基因型，用连锁标记umel656检测时，电泳条 带与掖478一致；在8号染色体位点均表现为抗性基因型，用连锁标记bnl91823 和umcl268检测时，电泳条带与90110一致；两者在7号染色体上的位点存在 差异，前者表现为感病基因型，后者表现为抗病基因型。 10和掖478间以及F2群体中表现出多态性的标记，其 SSR弓I物47对，筛选可在901 中13个SSR标记产生清晰的差异带，用于对定位群体进行SSR作图分析，最终将 的范围内，与umcl401和L6的遗传距离均为0．7cM。为了确定结果的可靠性，同 时构建了90110与掖478的F2群体在此区域的局部分子标记连锁图。 山东大学硕士论文 DNA进行扩增，经过筛选发现在亲本间存在多态性的引物有257个，在亲本间 没有多态性的引物有148个，无扩增产物和扩增条带极弱的有19个，多态率为 58％。其中引物$217扩增的条带在两个亲本问存在多态性，并且此多态性与抗 感、池的扩增结果相一致，差异带在340bp左右。测序结果表明这个片段全长 分序列及其随后的3’端序列匹配。该预测基因全长215lbp，由四个外显子和三 个内含子组成，编码蛋白属于半胱氨酸蛋白酶抑制因子家族，编码蛋白全长 184aa。 domain程序找到 利用生物信息学数据库maizesequence和NCBI的conserved 了4个存在于定位区间umcl401和L6之内的可能性比较大的候选基因。其中 GRMZM2G13 1926含有两个抗病基因保守结构域丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶和亮氨 基因的结构特征，这几个基因值得重点研究。 另外，本工作研究了三重SSR引物反应体系，找到了一个适用于同时可进 行三个玉米粗缩病抗病位点检测的反应体系，可应用于今后的分子标记辅助选 择育种。 本工作对玉米粗缩病7号染色体抗病位点进行了精细定位，筛选出部分候选 基因，并研究了三重SSR引物反应体系，为今后的玉米粗缩病抗病基因克隆和 分子标记辅助育种打下初步的基础。 关键词：玉米、玉米粗缩病、分子标记、基因定位 2 山东大学硕士论文 of locus chromosome7 Fine the on mapping conferring resistancetomaize(Zea dwarfdisease maysL．)rough ABSTRACT an fbodandfodder inthe Maize(ZeamaysL．)is important crop world， a crucial inthenation