玉米螟生防工程株构建的研究.pdfVIP

’ 中文摘要 中文摘要 玉米螟是世界性重大农业害虫之一，危害严重且分布极广。因其繁殖快、世 代多以及较强的农药抗性，对其进行化学防治将面临越来越大的困难。因此，寻 找高效、安全、环保的农药替代物已成为亟待解决问题。 茉莉酸甲酯(Methyl 育基础上通过双向电泳和MS技术鉴定了60个响应MJA处理的差异表达蛋白， 并对其进行了功能分析。对4个重要植物防御相关蛋白编码基因构建了原核表达 载体并成功诱导了重组蛋白，利用生物测定的方法验证了重组蛋白对亚洲玉米螟 玉米螟幼虫的生长发育产生了显著影响，生长抑制率分别达30．33％和34．14％。 御蛋白可能是一种良好的植物抗虫蛋白。 谷胱甘肽．S．转移酶是昆虫体内一类重要解毒酶系，它对许多有毒化合物具有 代谢消化作用，从而增强昆虫的抗性。采用RT-PCR和RACE技术从亚洲玉米螟 中肠中克隆了一个谷胱甘肽．S．转移酶基因，将其命名为OfGSr,并进行了生物信 息学分析。以此为基础，构建了原核表达载体并进行融合蛋白诱导表达，以纯化 的重组蛋白制备了多克隆抗体。Westernblot分析显示该解毒酶经丁布诱导后表达 自然饲喂取食法进行干扰效果检测表明，与对照组相比，干扰组亚洲玉米螟幼虫 死亡率高达54％，初步证明我们成功构建了亚洲玉米螟谷胱甘肽．S．转移酶基因的 RNAi工程菌，这为农业上对亚洲玉米螟进行生物防治提供了一条新途径。 关键词：亚洲玉米螟；玉米；荣莉酸甲酯；蛋白质组学：植物防御蛋白：生防工 程菌株构建 Abstract Abstract Asiancorn destructionand distribution, borer(Ostriniafurnacalis)，heavilywidely in its isoneofthemost theworld．Becauseof importantagriculturalpest rapid and a chemical resistance，the generationhavingstrongerpesticides production,more controlontheAsiancornborerfacesmoreandmore a and substituteof becomesa high-efficient,safeenvironment-friendlypesticide needtoberesolved． problem Inthe comandcornborerasresearch differentially research,bYtaking objects，60 toMJAtreatmentwereidentifiedthemeansof2D responded by expressedproteins MS maizeresistanceinducedMJA．Their and basedon the respond by analyzing functionswereconfir