重组大鼠肾上腺质素质粒对力竭运动大鼠心脏缺氧的保护作用的研究.pdfVIP

摘要 目的： 通过与真核表达载体pVAXl的重组，构建大鼠肾上腺髓质素真核 表达质粒(pVAx卜ADM)。采取肌肉注射法将不同剂量的重组质粒导入 大鼠后肢腓肠肌内，建立大鼠力竭缺氧模型，研究重组大鼠肾上腺髓 质素质粒对力竭运动大鼠心脏缺氧的保护作用。 方法： 1． 构建重组大鼠肾上腺髓质素质粒(pVAXl-ADM)：提取SD雄 进一步扩增cDNA模板并克隆至PMD-18T载体，将克隆产物亚克隆至 真核表达载体pVAXl上最终获得重组产物pVAXl-ADM。采取碱性裂解 法和聚乙二醇法反复大量提取足够浓度及纯度的重组质粒。 2． 雄性SD大鼠18只，体重(203±18．4)g，根据体重完全 随机分为3组，6只／组，分别为正常对照组、空载体组和pVAXl-ADM 700ug／kg组。3组大鼠分别注射生理盐水l ml、pVAXl质粒DNA生 ml和700u ml， 理盐水溶液1 g／kg剂量pVAXl一ADM生理盐水溶液1 1次／周，共注射4周