Pseudidomarina homiensis ZJCN121岩藻多糖酶生产、固定化和酶学性质研究.pdfVIP

摘要 本文对我国浙江苍南海域采集的样品(包括海水，海泥，礁石，海藻，腐木，海 贝)，采用平板稀释法分离海洋细菌，共分离得到细菌66株。以岩藻多糖为唯一碳源， 经过初筛和复筛得到5株产岩藻多糖酶细菌，占所筛细菌总数的7．58％；从腐木中分离 出产岩藻多糖酶细菌所占比例最高，为25％。其中菌株ZJCNl21的岩藻多糖酶产量最 高，酶活力为0．71IU／mL，且发酵性能较稳定，被确定为下一步研究对象。 ． rDNA序列， 本文考察了菌株ZJCNl21形态特征和生理生化特征，并测定了其16S 的变种。 为了提高岩藻多糖酶产量，对细菌ZJCNl21培养基组分和发酵条件进行优化。首 先通过单因素试验确定了最佳碳源为复合碳源(麸皮+葡萄糖)，最佳氮源为NH4N03， 糖酶的主要影响因素为麸皮、NaCl和岩藻多糖，利用最陡爬坡试验逼近最大响应区域， IU／mL。 岩藻多糖酶活力达到最高，为1．19 采用壳聚糖、凹凸棒石和D101．I树脂三种固定化材料对岩藻多糖酶进行固定化， 实验结果表明壳聚糖的固定效果好于其它二种载体；研究了壳聚糖吸附和戊二醛交联 对岩藻多糖酶的最佳固定化条件，将19壳聚糖载体加入到浓度为1．5％戊二醛中交联 定4h后，固定化酶酶活力为2．43 IU／g。对固定化酶和游离酶酶学性质也进行了研究， 实验结果表明固定化酶最适反应温度为55℃，游离酶为50℃；固定化酶半失活温度 为69℃，游离酶为62℃；固定化酶最适反应pH为7．O，游离酶为6．5；固定化酶和 关键词：假海源菌，岩藻多糖酶，响应面实验，液态发酵，固定化 Abs仃act Inthis kindsof se踟rater，seamud，searock，ro慨n s饥dy，m吼y s锄ples，includillg EastCKIlaSeaneart11e sea a11d collected丘om wood，se删，eedseashells，、Ⅳere C觚911锄of wereisoIated6-om of 66Strainsmame—deriVedbacteria Province，and regionZhen舀iang of dilutionmethod．Wi协舭oidanassolec绷加n theabove use s锄pIesby spreadplate Alcoidanases锄inswereobtailled and source，5 producing bypr进lary for7．58％oftotal fourldmattllerateofmarine—bacteria accountmg bacteria，a11d“was to bacteriais01ate-dfbm isolatedI．romrottenwoodme讹1of producing凡coidanse di归陌rent was deteminedas forits sampleshi曲，25％．ZJCNl2