HIV-P24酸适配体的筛选.pdfVIP

HIV-P24核酸适配体的筛选 摘 要 核酸适配体是通过SELEX技术筛选得到的一类寡核苷酸分子，能与靶分子 强特异、高亲和力地结合，并发挥生物学效应。由于其具有靶分子范围广、分子 质量小、免疫原性低、易于化学合成、改造和标记等优点，核酸适配体在临床诊 断和疾病治疗领域中显现出重要的应用价值。P24蛋白是1型人类免疫缺陷病毒 测定在临床医学中也是艾滋病病情监控的一个重要指标。本课题利用SELEX技 基础，对艾滋病的诊断和治疗具有重要意义。 随机寡核苷酸库中筛选能与P24结合的寡核苷酸，并通过凝胶阻滞实验(EMSA) 验证筛选到的次级库寡核苷酸与P24的结合。通过酶切、连接反应，将已获得的 杆菌JM．109形成单克隆以分离不同序列的寡核苷酸。利用不对称PCR制备寡核 核酸适配体识别P24的特异性。 经过l 较强结合能力的寡核苷酸。特异性检测显示，18和27号适配体只与P24特异性 结合，与人血清白蛋白、牛血清白蛋白和脱脂奶粉均不结合。 本研究成功筛选到2个特异性识别和结合HIV-P24的核酸适配体，这为核酸 适配体用于HIV-P24检测提供了一定的实验基础。 关键词：SELEX技术；HIV-P24t核酸适配体 IV Abstract screened SELEX aclassof molecules through are oligonucleotide Aptamers with and molecules affinityplay can bind high specificallytarget technique，which aswide ol have biochemicalmerits，suchrange many biologicaleffect．Aptamers molecular immunogenicity，easily molecules，smallweight，lOW target Inthe reveal value application and important marked．etc．Consequently，aptamers iscore of HIV-l， and ofdisease．P24 antigen fieldofclinical protein diagnosistherapy