TLR3在小鼠精细胞中的表达及功能.pdfVIP

目 录 中文摘要一～一～…………一…一……一一1 英文摘要～～一…一………一…一……一一2 缩略语表…一…一～………………………一4 前翮’ 言…～一…一…………～………～一6舌…～一…一…………～………～一 实验材料…一一一～一． ．．．．．．．．．．．．．．．．14 实验方法………一． 实验结果～一…………………一～……一．32 讨 论……一…一……一 小 结…一一一一 一．．69 参考文献～一……． …．．71 综 述…～一一． ．．．．．．．．．．78 发表论文 致 谢一…一…………………………一．100 北京协和医学院 博十研究_牛论文 中文摘要 背景与目的：睾丸是典型的免疫豁兔组织，却能有效的清除感染的病原体，睾丸细胞 的天然免疫防御功能长期受到研究者的关注，其调节机理有待迸一步揭示。Toll样受 体(TLR)n-q以启动睾丸体细胞的天然免疫反应，然而在生精细胞中的表达和功能尚未 做深入研究。本论文旨在系统研究TLR3在生精细胞中的表达和功能。 材料与方法：分离正常C57BL／6小鼠各期生精细胞，使用其标记基因。包括精原细 胞的标记基因K“，精母细胞的标记基因联会复合体蛋(j(synaptonemalcomplexprotein RT-PCR， 2，砌国；通过real—time 2，Scp2)，精子细胞的标记基因鱼精蛋白2(protamin 免疫组化及Western 中的表达；利用poly(I：C)激活生精细胞中的TLR3研究其在生精细胞中的功能及信号 通路。吖啶橙／溴化乙锭(AO／EB)混合染色，TUNEL染色及流式细胞仪分析生精细胞 的凋亡。 结果：发现小鼠生精细胞组成性的表达TLR3，主要定位于精原细胞和精母细胞， IRF．3的激活。另外TLR3的激活还可以诱导生精细胞的凋亡，这种作用可能是通过 上调TNF．口实现的。体外实验证明TNF．＆表现出双重功能：低浓度的TNF．位可以抑 制生精细胞的凋亡，而高浓度的TNF．a可以促进生精细胞的凋亡。 结论：TLR3表达于精原与精母细胞，生精细胞中TLR3的激活可以行使两方面的功 能：一方面启动生精细胞抗病毒的天然免疫反应，另一方面可以诱导生精细胞的凋亡， 为病毒感染干扰精子发生的机理提供了新的线索。 关键词：生精细胞；天然免疫；Toll．1ike受体；炎症；凋亡 北京协和医学院 博士研究生论文 Abstract and thetestisisaremarkable tissue， Backgroundobjectives：Although immunopriViIeged microbial canbe eliminated，Attentionshavebeen to effectively paid invading pathogens of cell-mediatedinnate mechanisms thedefensefunctiontesticular immunity-The to of