NEDD4在C40信号通路中的作用及其机制研究.pdfVIP

NEDD4在CD40信号通路中的作用及其机制研究 摘 要 N印D4在CD40信号通路中的作用及其机制研究 摘 要 NEDD4(Neuronalcell 4， precursorExpressedDeVelopmentallyDowllregulated toE6．AP 神经前体细胞表达的发育下调基因4)蛋白质属于含HECT(Homologous 的C2结构域，纠个WW结构域和C末端的HECT结构域，其底物往往含有PY 和NEaC等，生物学功能涉及T细胞成熟、神经发育、病毒出芽释放和膜受体的 降解与内化等。本实验室前期工作应用质谱技术鉴定A20细胞中CD40信号复合 通路的调控。因此，本课题研究了NEDD4在CD40引起的下游通路激活过程中所 影响，提示NEDD4可能是附3的泛素E3酶。通过比较对照细胞和过表达 NEDD4基因敲除的na～eB淋巴细胞，发现NEDD4在一定程度上影响CD40信号 通路下游蛋白质p38的激活。由于NEDD4基因全身敲除的小鼠胚胎致死，为了能 得到NEDD4基因敲除的B淋巴细胞，我们通过胎肝移植的方法重建受体小鼠的 B淋巴细胞，通过PI 免疫系统，成功得到了胎肝嵌合体。分离嵌合体小鼠的彻_：jfve 染色和CFSE染色测定细胞的死亡和增殖，发现NEDD4对细胞的存活和增殖没有 B淋巴细胞时发现，NEDD4基因 影响。用CD43(Lry．48)MicroBeads负选nd¨Ve 敲除的脾脏淋巴细胞中CD43阴性的细胞含量明显增加。提示NEDD4在B细胞的 发育及激活过程中可能发挥一定作用。综上所述，本研究结果提示NEDD4通过影 响TRAF3的泛素化参与CD40介导的p38的激活。 关键词。NEDD4，CD40，TI认F3，泛素化 2 NEDD4在CD40信号通路中的作用及其机制研究 Abstract TherolesofNEDD4inCD40 sign aling Abstract cell an NEDD4(NeuronalprecursorExpressedDeVelopmentallyDowllregulated4)is E3 whichcontainsme toE6-AP ubiquitinligase HECT(HomologousC—Terminus) t0human．NEDD4consistsof C2 domainandconserVesf．romveast anN．teminal WW aC．temliaIll domainandbindstoPY domain，2．4domams，aIld HECT-typeligase and insubstrate LPxYPPxY)modifSproteins (including includingPTEN，Rap2A， aIldNEaC．NEDD4 f．actor