NPM1在小鼠泡发育和黄体形成过程中的表达和功能研究.pdfVIP

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2015-11-02 发布于贵州
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NPM1在小鼠泡发育和黄体形成过程中的表达和功能研究.pdf

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] 中文摘要……………………………………………………………………………………………．I 英文摘要…………………………………………………………………………………………。III I弓l言………………………………．．．。…………………………………………………………………………………………．．1 1．1卵泡发育与黄体形成的研究进展…………………………………………………………。1 1．1．1卵泡发育及其调控………………………………………………………………………l 1．1．2排卵机制及其调控………………………………………………………………………3 1．1．3黄体的形成及其调控……………………………………………………………………4 1．2NPMI基因的研究进展……………………………………………………………………。5 1．2．1 NPMI基因的生物学特性………………………………………………………………5 1．2．2 NPMI基因的生物学功能………………………………………………………………6 1．2．3 NPMI基因与动物生殖………………………………………………………………．10 1 1．3本研究的目的与意义………………………………………………………………………。1 2材料与方法……………………………………………………………………………………．．13 2．1实验动物……………………………………………………………………………………13 2．2动物模型……………………………………………………………………………………．13 · 2．2．1小鼠性成熟模型………………………………………………………………………．13 2．2．2 PMSG诱导卵泡发育模型…………………………………………。…………………13 2．2．3 PMSG／11CG诱导的排卵模型…………………………………………………………13 2．2．4 PMSGmCG诱导的黄体形成模型……………………………………………………．13 2．3原位杂交………………………………：……………………………………………………13 2．3．1 cRNA探针的制备………．．．……………………………………………………………13 2．3．2原位杂交过程…………………………………………………………………………16 2．4小鼠卵巢颗粒细胞收集和体外培养………………………………………………………l8 2．5NSC348884处理的体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞活力分析……………………………18 2．5．1标线测定………………………………………………………………………………．．19 2．5．2细胞活力测定…………………………………………………………………………。19 2．6Western blot方法……………………………………………………………………………………………………．19 2．7 基因的表达………………………………………………………………………………。2l 2．7．1 PCR引物的设计………………………………………………………………………2l 2．7．2颗粒细胞总RNA提取………………………………………………………………。2l 2．7．3反转录反应……………………………………………………………………………．21 2．7．4 PCR反应…………………………………………………………………………………………………………22 2．7．5 PCR产物相对定量分析………………………………………………………………．22 3结果……………………………………………………………………………………………………………………………．23 3．1NPMlmRNA在小鼠卵泡发育和黄体形成过程中的表达………………………………．23 3．1．1 NPMlmRNA在小鼠性成熟中卵泡发育过程中的表达………………………………23 东北农业大学理学硕士学位论文 3．1．2 NPMlmRNA在PMSG诱导下小鼠