NR2A转基因鼠前额叶突触可塑性及其相关功能的研究.pdfVIP

2010华东师范人学博七论文 摘要 摘 要 前额叶皮层(Pref．rontalcortex)在逻辑推理、行为抑制、灵活性学习、工作 记忆以及注意力调节等脑的高级功能中起重要作用。该部位的损伤与精神分裂 症、帕金森病、注意力损伤多动症等许多神经、精神以及心理疾病有关。 a．眦e N．甲基．D．天门冬氨酸受体(N．methyl．D．aSpreceptor’NMDAR)是一类 兴奋性氨基酸受体，对神经系统发育和生理功能具有重要作用。NMDA受体是 内NMDA受体共有的亚基，NR2亚基的不同组成是影响其功能的决定因素。同 关于NMDA受体及亚基在前额叶区突触可塑性及相关神经功能中作用的研究却 较少。 可以诱导小鼠精神分裂症样行为，并造成相关工作记忆的损伤；进一步研究发现， 幼年期丌始慢性腹腔注射PCP，有精神分裂样行为表现，并且前额叶区突触膜上 和内质网内NR2A亚基的表达量增加，。由此推测NR2A亚基在前额叶相关认知 功能中具有重要作用并与精神分裂症有密切关系。来自NI也A亚基敲除小鼠的 弱，并表现出焦虑样行为。那么，NR2A亚基过量表达，前额叶突触可塑性会发 生哪些改变?前额叶脑区相关功能会有哪些变化?我们采用NR2A转基因小鼠， 将分子生物学、免疫组织化学、离体脑片电生理技术与整体行为学技术相结合， 从分子、细胞突触和整体不同水平研究NR2A亚基在前额叶区过量表达对于小 鼠前额叶突触可塑性和前额叶相关功能的影响。 1．Nl毪A转基因小鼠前额叶区Nl毪A表达的研究 NR2A转基因小鼠是采用Q钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(QC洲．Kinause．II) 别从RNA和蛋白水平上检测3月龄转基因小鼠前额叶区NR2A的表达及分布状 况。 为同窝对照组小鼠的2．7倍，而NRl、NR2B表达则无明显变化： 2010华东师范大学博士论文 摘要 约为同窝对照组小鼠的1．54倍，而NRl、NI也B表达则无明显变化； 3)免疫组化的实验证实：NR2A亚基确实在前额叶脑区过量表达。 以上数据表明，Nl也A亚基在NI匕A转基因小鼠前额叶脑区过量表达。 2．Nl匕A转基因小鼠前额叶区突触可塑性的研究 NMDA受体是电压和配体双重门控离子通道受体，在中枢神经突触可塑性 中起着重要作用。长时程增强 (Long．tennpotentiation，L1rP)和长时程抑制 1)前额叶区基本突触传递的研究：记录NR2A转基因小鼠与同窝对照小鼠 excited 前额叶区兴奋性突触后电位(Field poStsyn印ticpotential，EPSP)的 cun，e)和双脉冲抑制反应(P妇d 刺激强度．反应曲线(Input．ou巾ut pulse 的基本突触传递无明显变化，数据提示NI也A转基因小鼠前额叶区突触 前神经元递质释放和突触后 AMPA受体 ( acid AIIlin0·3-hydro)()，·5·m甜lylisoxazole-4一propioIlicReceptor’ AMPAR)功能无显著改变。 小鼠前额叶区U1P。结果显示，NR2A转基因小鼠LTP显著小于同窝对 照小鼠。此外，我们采用不同低频刺激，在两组小鼠前额叶诱导LTD。 与同窝对照组小鼠相比，NR2A转基因小鼠前额叶区LTD明显受损。使 被逆转。结果提示NR2A亚基过量表达损害了NR2A转基因小鼠前额叶 区L1rP和L1’D的诱导。 由此我们推测，NR2A亚基过量表达，可能缩短了NMDA受体通道开放时 间，减少了NMDA受体通道转运Ca2+离子量，使得前额叶脑区NMDA受体功 能减弱，从而导致NR2A转基因小鼠前额叶脑区双向长时程突触可塑性减弱。