GlyRS通过LP4调控奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成的机理.pdfVIP

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2015-11-02 发布于贵州
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GlyRS通过LP4调控奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成的机理.pdf

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曼寰皇舅曼皇寰曼!曼!皇皇皇皇鼍曼曼曼曼曼量鼍皇曼曼曼曼曼皇曼V1’Ji■=寰目录摘要……………………………………………………………………………………………………………………………一I 英文摘要………………………………………………………………………………………III 1前言…………………………………………………………………………………………………………………………1 1．1乳腺的发育及泌乳………………………………………………………………………1 1．2奶牛乳蛋白合成及调控…………………………………………………………………l 1．2．1奶牛乳蛋白合成的机制及影响因素…………………………………………………2 1．2．2奶牛乳蛋白合成信号通路相关研究…………………………………………………2 1．3ELP4相关研究……………………………………………………………………………5 1．4氨基酸对泌乳的调节作用………………………………………………………………一7 1．5氨酰tRNA合成酶的相关研究………………………………………………………．7 1．5．1氨酰tRNA合成酶的结构与功能…………………………………………………一7 1．5．2甘氨酰tRNA合成酶相关研究………………………………………………………9 1．6NFr．B1相关研究…………………………………………………………………………9 1．7实验目的与意义…………………………………………………………………………………………一10 l 2材料与方法…………………………………………………………………………………．1 2．1实验材料………………………………………………………………………………．．11 2．1．1主要实验试剂………………………………………………………………………11 2．1．2主要实验仪器………………………………………………………………………1l 2．1．3实验动物与细胞……………………………………………………………………ll 2．1．4溶液配制……………………………………………………………………………12 2．2奶牛乳腺上皮细胞的培养纯化与鉴定…………………………………………………14 2．2．1奶牛乳腺上皮细胞的原代培养与纯化……………………………………………．14 2．2．2奶牛乳腺上皮细胞的鉴定…………………………………………………………15 2．2．3奶牛乳腺上皮细胞的冻存及复苏…………………………………………………．16 2．3泌乳模型的建立………………………………………………………………………～17 2．3．1 2．3．2WB检测添加Met后CSN2的表达………………………………………………18 2．4ELP4在奶牛乳腺上皮细胞中的表达…………………………………………………一19 2．4．1 WB检测添加蛋氨酸泌乳模型中ELP4的表达……………………………………19 2．4．2奶牛ELP4基因真核表达载体的构建……………………………………………～19 2．4．3ELP4过表达后对CSN2的影响…………：…………………………………………21 2．5GIyRS通过ELP4调控奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白的合成………………………………22 I 万方数据东北农业大学理学硕士学位论文 2．5．5 2．5．6 2．5．7 2．6数据分析………………………………………………………………………………．28 3结果与分析…………………………………………………………………………………29 3．1奶牛乳腺上皮细胞培养与泌乳模型的建立……………………………………………29 3．1．1奶牛乳腺上皮细胞的原代培养与纯化……………………………………………．29 3．1．2奶牛乳腺上皮细胞的鉴定…………………………………………………………30 3．1．3体外泌乳模型的建立………………