OST对KCN1蛋白糖基化影响的初步研究.pdfVIP

中义摘要 OST对KGNE1蛋白糖基化影响 的初步研究 研究生：徐舒导师：沈之君教授 离子通道与疾病课题组 东南大学“发育与疾病相关基因”教育部重点实验室， 东南大学生命科学研究院，中国江苏省南京市四牌楼2号，210096 中文摘要 KCNEl作为辅助亚基与功能亚基KCNQl以4：2的比例装配形成异源多聚体 表达使KCNQl通道电流增加，激活速率减慢，电压依赖性曲线呈正向偏移，因而KCNEl 对于KCNQl／KCNEl通道慢激活特征的维持是不可替代的。 作用，但具体的调节效应不明，KCNEl糖基化的调控机制也没有明确的报道。 OST)的作用下从多 的过程中。高甘露寡聚糖在糖基转移酶(oligosaccharyltransferase 萜醇D01．PP转移到靶蛋白的天冬酰胺上。哺乳动物细胞的OST是由9个亚基组成的复 糖基化位点的双重功能。 我们通过siRNA 调影响了KCNEl N．连接糖基化的水平，使其蛋白糖基化与非糖基化比例下降了20％ (氏0．01)。由此证明了KCNEl蛋白N．连接糖基化受到OST酶的调节。 为了解KCNEIN．连接糖基化的功能，我们构建了针对KCNElN．连接糖基化位点 中文摘要 KCNQI共同表达。运用全细胞膜片钳技术，我们以电流密度、标准化I-V曲线及通道 激活／失活时间常数t值等电生理参数为指标，这三种突变体与野生型KCNQl／KCNEl N- 相比都没有显著差异，通道的电压依赖性特征没有改变。这一结果提示我们KCNEl 行的。 关键词：KCNEl；N．连接糖基化；OST；突变体 英文摘要 Prelimina stuontheeffectof0ST ry dy onthe onofK．CNE1 glycati GRADUATESTUDENT：XUShuSUPERVISOR：Prof．Shell Zhijun IonChannelsandDiseases Group of andHumman ofEducationofChina KeyLaboratoryDevelopmentalgenes disease，Ministry Southeast ofLife 21 University,Institute 0096，China Sciences，Nanjing Abstract KCNEl and 1 formthefunctionalheterotetramer1／KCNE1 channelsina KCNQ KCNQ ratioof4：2．KCNElalonecan’tformfunctionalchannelswhile with any CO-