P53新结合蛋的发现及其对P53的调控.pdfVIP

摘要 摘要 肿瘤抑制因子P53在抑制肿瘤细胞恶性增殖及维持基因组稳定性方面发挥 重要作用。大部分癌症的发生与P53功能的缺失密切相关。在不同的胁迫刺激下， P53能选择性地诱导细胞生长抑制或凋亡：当细胞遭受轻微损伤时，将细胞周期 阻滞于Gl期，抑制受损DNA的继续复制，使损伤细胞得以修复；或者在某些 情况下促进细胞凋亡，消除严重受损的细胞，保护基因组稳定，防止癌症发生。 微小染色体维持蛋白(minichromosomemainten锄ce，MCM)是一组存在于古 细菌及真核生物中，对基因组的复制起重要作用的保守蛋白。其中，Mcm2．7在 生物体中以六聚体DNA解旋酶的形式存在，参与DNA复制的起始及延伸过程。 然而，Mcm蛋白在细胞中的表达量远远超出了DNA复制的需求，暗示了Mcm 蛋白可能还存在一些其他功能。 据报道，许多肿瘤中都出现了Mcm7的过表达。为了探究Mcm7在细胞癌 变过程中扮演的重要角色，我们通过一系列的实验，检测Mcm7是否影响肿瘤 抑制因子P53的功能。我们发现，Mcm7是一个新的P53结合蛋白。我们在体内 发现P53的C末端结构域介导了与Mcm7的相互作用。 我们运用荧光素酶报告基因实验，分析了Mcm7对P53转录活性的影响。 及U20S细胞中，我们也得到了类似的结果。有趣的是，在Hela细胞中我们用 sh min延长至40 RNA技术干扰Mcm7的表达后，P53的半衰期从20min。然而， 了进一步研究在U20S细胞中Mcm7抑制P53转录活性的机制，我们在u20s 我们的研究发现Mcm7是一个新的P53作用蛋白。Mcm7能够结合P53，并 抑制P53介导的基因转录。Mcm7与P53在细胞质中的共定位，暗示了Mcm7 可能通过结合P53，将P53束缚在细胞质中，P53无法进入细胞核从事基因转录， 从而间接的使P53失活，促进癌细胞的增殖。 关键词：P53；Mcm7；转录抑制 Abstract Abstrac七 Thetumor P53isoneofthe tumor suppressor key suppressorsprotecting cancerand abnonnalities．LossofP53凡nctioncontributestothe against genetic ofmostcancers．P53mediatesthecellular tovariousst代sses deVelopment response by either arreSt，whichthe of DNA，or inducinggro、nh preVentsreplicationdamaged cell is for defectiVecelJs． death(apoptosis)，whichimpor钮nteliminating 7rheminichromosome consistofa of maintenance(MCM)proteinsgroup conservedfactors inthe ofthe ofarchaeand fhnctioningreplicationgenomes these，Mcm2—7arerelatedtoeach0therand eukaryotico唱anisms．Among proteins fonnahexamericDNAhelicases i