PEG--600模拟干旱胁迫下小偃麦异附加系SN6306差异表达基因的筛选.pdfVIP

lUIIUI IIHIItlIIIllllIltll 符号说明 万方数据 目 录 中文摘要………………………………………………………………………………………．I Abstract．．…．．．．．．…．…．．．．．…．．．…．…．．．．．．．．……．．．．…．．………．．．……．．．．．．……．．……．．．．…．…．．．．．．．．．．．…．．．．．．．．．．III 1前言………………………………………………………………………………………………………………………．1 1．1植物适应干旱胁迫的机制………………………………………………………………～1 1．1．1植物适应干旱胁迫的形态机制………………………………………………………一2 1．1．2植物适应干旱胁迫的生理生化机制…………………………………………………一2 1．1-3植物适应干旱胁迫的分子机制………………………………………………………．．5 1．2植物抗早相关基因的研究进展…………………………………………………………．7 1．2．1植物基因的分离与克隆技术…………………………………………………………一7 1．2．2 GeneFishing技术……………………………………………………………………………………………．12 1．2．3植物抗旱相关基因的克隆……………………………………………………………15 1．2．4小麦抗旱相关基因的克隆……………………………………………………………15 1．3植物海藻糖6一磷酸磷酸酶的研究进展…………………………………………………16 1．4植物木葡聚糖内转糖苷酶／水解酶的研究进展………………………………………一16 1．5研究的目的和意义………………………………………………………………………17 1．6主要研究内容……………………………………………………………………………18 2材料与方法………………………………………………………………………………．．19 2．1植物材料…………………………………………………………………………………19 2．2菌株和载体………………………………………………………………………………．19 2．3酶、生化试剂以及试剂盒………………………………………………………………19 2．4主要溶液配方……………………………………………………………………………19 2．5主要生化仪器……………………………………………………………………………20 2．6设计与合成的引物………………………………………………………………………20 2．7方法…………………………………………………………………………………………………………………一2l 2．7．1 SN6306萌发期抗旱性的鉴定…………………………………………………………21 2．7．2 SN6306苗期抗旱性的鉴定……………………………………………………………22 万方数据 2．7．3 2．7．4小麦TaXTH基因的克隆及序列分析…………………………………………………27 2．7．6TaTPP转拟南芥和小麦的表达载体的构建…………………………………………．33 2．7．7小麦SN6306TaTPP基因的可变剪切克隆…………………………………………．37 3结果与分析………………………………………………………………………………。38 3，1SN6306萌发期抗旱性的鉴定…………………………………………………………。38 3．2SN6306苗期抗旱性的鉴定……………………………………………………………。40 3．3 3．3．1RNA浓度与纯度的检测………………………………………………………………42 3．3．2反转录合成第一条eDNA链…………………………………………………………42 3．3．3 3．4小麦TaXTH基因的克隆与分析…………………………………………………．49 3．4．2 XTH蛋白的多序列比对及系统发育分析……………………………………………52 3．5小麦TaTPP基因的克隆与分析………………………………………………………。54 3．5．2小麦死乃)P基因编码蛋白多序列联配及系统进化树的构建…………………