Pseudomnas sp. DY1和Micrococcus sp.BD15对染料的脱色特性及机理研究.pdf

摘要 偶氮染料和三苯甲烷染料广泛应用于印染、食品、造纸等各个领域，由于 很多染料都具有生物毒性且难以自然降解，因此，对环境水体造成了严重的污染。 传统的理化处理方法处理成本昂贵且易造成二次污染，严重阻碍了其广泛应用， 而生物处理方法作为一种环境友好型处理手段受到环境工作者的青睐。某些细菌 具有生长快、处理效率高等优势，在染料废水的生物治理中具有广阔的应用前景， 通过对这类细菌脱色特性和脱色机理详细深入的研究，可以为染料废水的生物治 理奠定理论基础。 本论文分别从腐木覆盖的土壤和曝气池的污泥中筛选到了两株染料高效脱 色菌株Pseudomonas sp．菌株DYI和Micrococcussp．菌株BDl5，详细研究了两种 菌株对偶氮染料或三苯甲烷染料的脱色特性，并采用统计学手段对其脱色条件进 行优化；采用现代分析手段对两种菌株对偶氮染料或三苯甲烷染料的脱色机理进 行了深入研究；并最终通过菌株固定化和毒理学研究探讨了这两株菌的实际应用 潜能。本论文的主要研究结果如下： (1)染料高效降解菌株的分离和鉴定：从自然环境中分离到两株偶氮染料 酸性黑172或三苯甲烷染料孔雀石绿高效脱色菌株，通过16SrDNA和生理生化 鉴定确定这两株菌株分别为Pseudomonas sp．菌株DYl和Micrococcussp．菌株 BDl5，其中菌株DYl对酸性黑172和孔雀石绿均有较好的脱色效果，而菌株 BDl5则仅对孔雀石绿脱色效果较好。 (2)菌株DYl对酸性黑172的脱色特性和条件优化：实验结果表明大多数 氮源能够促进脱色，而碳源则对脱色没有影响或抑制脱色。高浓度的Fe2+、Fe3+ 和Ca2+(10mM)存在时，仍观察到较高的脱色率。在此基础上，采用PB设计 筛选出酸性黑172脱色的主效应因子：pH、温度、Fe3+浓度和NaH2P04浓度。 随后采用响应面设计对主效应因子进行优化，结果表明该过程可以用二次模型进 6．23、30oC、8．0 mM的Fe3+和10．0 行解释，脱色的最佳操作条件为：pH g／L的 NaI-12P04，验证实验结果在实验模型的置信区间内。此外，在最优条件下，该菌 株对酸性黑172的脱色动力学符合对数动力学模型(R2=0．964)。 (3)菌株DYI加热致死细胞和活细胞对酸性黑172脱色特性的比较研究： 菌株DYl对酸性黑172的吸附动力学数据与假二次模型的拟合度较好。起始染 料浓度能够显著促进热致死细胞的吸附量，其最大吸附量可达2．98 mmol／g biomass；而活细胞对染料的吸附量则不受染料浓度的影响。随着菌体处理温度 的升高，该菌株对染料的吸附能力也随之增加。电位滴定和FTIR扫描结果表明 氨基基团在吸附的过程中起到关键作用。SEM、AFM和TEM分析说明对菌体进 行热处理后细胞壁的通透性增加且胞内蛋白变性。不同细胞成分的吸附实验结果 肯定了胞内蛋白是导致热致死细胞吸附量增大的主要原因。 (4)菌株DYl对孔雀石绿的降解特性、降解酶系和降解途径研究：实验结 果表明该菌株在振荡条件下、24h内对高浓度的孔雀石绿(100．1000 mg／L)显 示出较高的脱色能力(脱色率为90．3．97．2％)，而在静止条件下，该菌株的脱色 6．6 率比振荡条件下低，但仍高达78．9％以上。脱色的最佳pH和温度分别为pH mM)能够显著促进脱色。通过IⅣ—Ⅵsible、GC．MS 和28．30。C，M92+和Mn2+(1 和LC．MS分析获得降解中间产物主要为孔雀石绿甲醇、二甲氨基二苯甲酮、甲 氨基二苯甲酮、氨基二苯甲酮、二苯甲酰甲烷和N，N．二甲基苯胺．酶分析实验 结果表明锰过氧化物酶、NADH．DCIP还原酶和MG还原酶可能与该菌株降解孔 雀