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Myostatn调控的microRNA的筛选.pdf
北京协和医学院硕士研究生论文
目录
中文摘要…………………………………………………………………………………1
ABSTRACT………………………………………………………………………………………………………..2
文献综述…………………………………………………………………………………3
第一部分 MYosTATIN在肌肉发育调控中的作用……………………………………………………。3
——, 弓I言……………………………………………………………………………………………………………………………………3
二、Myostatin的表达及调控研究进展……………………………………………………………………3
三、Myos协tin在骨骼肌发育过程中的作用…………………………………………………………….4
四、Myos诅tin调控骨骼肌发育的分子机制…………………………………………………………….6
五、总结和展望……………………………………………………………………………………………8
第二部分 MIRNA征骨骼肌发育中的功能研究………………………………………………………lO
——、弓I言………………………………………………………………………………………………………………………………….1()
_-:、MiRNA的生成和作用机制…………………………………………………………………………lO
三、MiRNA在骨骼肌发育中的调控…………………………………………………………………..13
7
四、 以Myos协tin为靶基冈的miRs的研究进展…………………………………………………………l
五、总结和展望…………………………………………………………………………………………。l8
材料和方法……………………………………………………………………………。l9
第‘。部分实验材料………………………………………………………………………………………19
一、实验动物……………………………………………………………………………………………19
,:、卡要仪器及设备…………………………………………………………………………………….19
三、引物…………………………………………………………………………………………………20
l
四、主要化学试剂……………………………………………………………………………………….2
五、软件及统计学分析………………………………………………………………………………….24
第二二部分实验方法………………………………………………………………………………………25
一、小鼠繁殖……………………………………………………………………………………………25
二、组织总RNA的提取…………………………………………………………………………………25
三、变性胶电泳检测RNA完整性………………………………………………………………………26
四、小鼠血清制备……………………………………………………………………………………….26
五、 Real.timeRT-PCR………………………………………………………………………………………………………………26
六、从小鼠趾提取DNA(基冈纽):…………………………………………………………………29
七、小鼠基因型答定…………………………………………………………………………………….29
八、小鼠肌肉冰冻切片制备……………………………………………………………………………。3l
实验结果………………………………………………………………………………..32
一、 科学问题以及研究策略…………………………………………………………………….32
l、 小鼠繁殖…………………………………………………………………………………………………………………………。33
2、 收集小鼠组织、血清以及OCT包埋小鼠腓肠肌………………………………………………….34
北京协和医学院硕士研究生论文
3、 样品总RNA提取及质鼍鉴定………………………………………………………………………36
二、
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