利用核移植技术iPS细胞获得克隆小鼠.pdfVIP

摘 要 摘 要 stem 诱导产生的多能性干细胞(inducedpluripotent cells，iPS细胞)是将在胚胎干细胞 子高度表达从而将已经分化的体细胞重编程得到的多能干细胞。目前科学家们已经先后从不 同物种的体细胞诱导得到了iPS细胞系，其中除了小鼠，大鼠外还包括恒河猴，牛和猪在内 大动物的iPS细胞系以及人的iPS细胞系。大动物的iPS细胞系的建立为农业生产上利用核 移植技术生产基因修改的大动物带来了新的希望。由于至今科学家们还不能成功培养出大动 物真正的ES细胞系，所以大动物的iPS细胞的产生避开了这一难题。虽然也有报道显示可 以利用体细胞核移植技术得到基因修改的大型克隆动物，但是由于体细胞定点基因打靶的效 率和体细胞克隆动物的出生效率都非常低导致这一方法一直没有被真正应用。一旦利用iPS 细胞作为供核细胞进行大动物的克隆将大大缩短试验周期和更容易的得到转基因动物．尽管 我们前期的研究已经证明小鼠iPS细胞具有类似于ES细胞的多能性，进行四倍体囊胚注射 可以产生正常的小鼠，但是在大动物进行四倍体囊胚注射却非常困难。目前还没有人知道是 否能够利用iPS细胞通过核移植的方法获得克隆动物。在本实验中我们成功得NT小鼠iPS 细胞作为核供体的克隆动物，并且利用iPS细胞作为核供体通过核移植技术获得克隆小鼠的 效率和利用正常ES细胞的效率是相同的。在本实验中，我们成功获得了15只克隆小鼠，其 中6只存活正常并且可以进一步生育后代。所以我们的实验结果证明iPS细胞可以被卵母细 胞成功重编程为全能性克隆胚胎得到正常的克隆动物。为进一步利用大动物iPS细胞生产基 因修饰动物奠定了基础。 关键词重编程；核移植；胚胎干细胞；可诱导的多能干细胞 ABSTRACT 。 基詈詈I——I,詈鼍曼曼皇量寡暑曼詈暑!!罡鼍曼苎皇皇墨皇曼摹詈鼍 Mice fromInduced Cloned Pluripotent Stem Cells(iPSCs) Abstract Recentadvancesincell have 1ndicatedthatdifferentiatedsomaticcells reprogrammingclearly canbe intoinduced stem are reprogrammedpluripotentcells(iPSCs)thatfullypluripotentby the and factors．Aswe Oct4，Sox2，Klf4 known，iPSCs ectopicallyexpressing c-Myctranscription havebeen inseveralother therhesus successfullygenerated species，includingmonkey,rat， of knockoutorknock—inanimals bovine，and generationgene large through pig．Subsequently,the thetransferof modifiediPSCnucleiintoenucleatedhasbeen