原油降解真菌分和降解及芳香烃降解基因的转录谱分析.pdf

， ．吾 i2 C e J王 Ⅷ砬饼 XK 昭 b( ：呲M㈨m一 ●B洲_ 麓燃 篇雠 for Dissertationthe ofDoctor Degree ISOLATIONANDDEGRADATIONOFCRUDE OILDEGRADEDFUNGIANDTHE TR ANSCRIPTPROFILEANALYSISOFTHE AROMATICHYDROCARB0N GENES Candidate： QuLina Supervisor： Prof．WangQiuyu Associate Supervisor： Academic for： DoctorofScience DegreeApplied Speciality： Genetics Dateof0ralExamination：14 June，2014 Northeast Forestry University： University 万方数据 摘要 摘要 石油作为能源被广泛利用，但在石油开采、运输及生产过程中对土壤环境产生的污 染也是严重困扰人类的问题。污油的处理方法很多，包括物理、化学和生物等修复方 法，其中生物修复以安全、经济，无二次污染等优点备受关注。但原油中组分复杂，污 染土壤的生物修复难度也很大，尤其是石油中的芳香烃类成分更难被微生物所利用，因 此，分离筛选原油降解微生物，研究其对原油组分的代谢特点，并采用转录组测序技术 探讨原油降解真菌的芳香烃降解相关基因表达，为今后芳香烃高效降解菌的筛选和开发 提供技术支持，从而进一步提高原油污染的生物修复效率。 本研究从大庆油田地区长期油污土壤中分离得到了12株高效的原油降解真菌，通 过菌落形态、菌丝形态、生理生化实验及ITS序列对己分离真菌进行了鉴定，确定其近 缘种属：Hl、H3、H9、X9与X12属于镰刀菌属(Fusarium sp．)；H2属于土曲霉 terreus)，H4属于雅致放射毛霉(Actinomucor (Aspergillus elegans)，X1属于植物内 生菌(Fungalendophyte)，X3属于真菌菌株(Fungalsp．)，X7属于黄白生丛赤壳菌 (Bionectria ochroleuca)，X11属于葡萄穗酶菌(Stachybotryssp．)，D4属于木霉菌 (Trichodermaatroviride)。 在液体培养条件下研究了pH、氮源和磷源对12种真菌菌丝干重的影响，结果发现 12种原油降解真菌均在pH7．0时生长旺盛，获得较高的菌丝干重，H9和X12真菌