油菜种子脂肪酸成的遗传调控及转基因油菜脂肪酸含量异交稳定性研究.pdf

Dl‘ssertan‘onforMaster StudiesonGenetic of Acid in Fatty Regulation Composition and of AcidContentsin RapeseedOutcrossingStabilityFatty Lines Transgenic Candidate：DUHai Guanting Supervisor：Prof．Wu Discipline：Botany of Science， CollegeChemistry＆Life Normal 321004， Zhejiang 本研究得到浙江省自然科学基金的资助(Z306077) Thisworkwas the fromtheNaturalScience supportedby grants Foundationof Province(Z306077) Zhejiang 油菜种子脂肪酸组成的遗传调控及转基因油菜 脂肪酸含量异交稳定性研究 摘要 油菜是重要的油料作物，菜籽油在我国食用植物油供给中占有举足轻重的地 位，因此发展油菜生产是缓解我国食用植物油供给紧张形势、保障其供给安全的 根本途径。迄今，我国双低油菜育种取得显著成绩，双低油菜普及率已达70％以 上，在此基础上，高油酸油菜育种日益受到重视。另外，因串粉异交所导致的油 菜籽芥酸含量回升和油酸含量下降已成为双低油菜生产中的一个亟待解决的实 际问题。从育种的角度赋予油菜一种串粉异交后仍能保持低芥酸和高油酸含量基 本不变的机制无疑是解决这一问题的一种良策。 根据以上背景，本实验室开展了建立基于脂肪酸延伸酶1基因FAEl和 △12．油酰脱饱和酶基因FAD2干涉表达的异交稳定型低芥酸、高油酸机制的探索。 围绕这一目标，在已有工作基础上，本研究验证FAEI干涉表达转基因株系保持 低芥酸含量异交稳定能力；对FAD2干涉表达转基因株系进行分子鉴定和脂肪酸 组分分析，筛选低亚油酸和亚麻酸转基因材料并验证其保持异交稳定能力：通过 杂交聚合明确两目标基因协同干涉表达对油菜种子脂肪酸组分的调控作用。主要 研究结果如下： 1、将FAEl干涉表达的低芥酸转基因株系与三个常规高芥酸品种(系)杂 交，经测定验证，转基因株系与杂交种子的芥酸含量相当，油酸含量变化不大， 说明FAEl干涉表达转基因株系具有很强的保持低芥酸含量异交稳定的能力，且 保持了油酸含量的基本稳定。 2、对T2代FAD2干涉表达转基因株系进行PCR检测，绝大多数植株都能扩 分析表明目标基因FAD2的表达受到明显抑制。这些结果说明，转基因已经整合 到受体亲本基因组中并能稳定遗传。经脂肪酸组分分析，T2代收获种子中亚油 酸含量约2-3％(对照为11．97％)，亚麻酸含量约为3％(对照为6．49％)。 3、将FAD2干涉表达转基因株系与亚油酸和亚麻酸含量较高的三个常规品 种(系)杂交，杂交种子亚油酸和亚麻酸含量平均为6．09％，与转基因植株的5．47％ 相近，远低于三个常规品种(系)的18．65％～22．82％，表明FAD2干涉表达转基 因株系在异交条件下能够很好地保持低亚油酸和亚麻酸含量的稳定。 4、脂肪酸组分分析和比较表明，FAEl基因干涉表达使芥酸和花生烯酸含量 64．05％；FAD2基因干涉表达使亚油酸和亚麻酸含量分别降低78．5％和51．8％， 油酸含量上升10个百分点；两目标基因协同干涉表达有效抑制了亚油酸、亚麻