《CXCR4的调控作用研究》.pdfVIP

浙江中医药大学学报2014年3月第38卷第3期 HIF—let对间充质干细胞SDF一1／CXCR4的 调控作用研究 周丽萍 余勤 刘丽珍z刘伟 胡韶君 、 1．浙江中医药大学 杭州 310053 2．浙江大学医学院附属第一医院 摘要：[目的]探讨缺氧诱导因子一1d (hypoxiainduciblefactor-1c~，HIF-lct)对间充质干细胞基质细胞衍生因子一1(stromalcell—derivedfactor一1， SDF一1)／CXC趋化因子受体 4(chemokinereceptor4，CXCR4)的调控作用。防法]贴壁法培养ICR小鼠骨髓间充质千细胞(mesenchymalstem cells，MSCs)；采用RNA干扰技术用 SuperFectinMTII转染HIF一1dsiRNA于MSCs；实验分为五组：常氧组、缺氧组、转染ControlsiRNA组、转染 HIF-Io~siRNA常氧培养组、转染HIF一10【siRNA缺氧培养组；RT-PCR检测HIF-lot、SDF-lct、CXCR4mRNA表达水平；Westernblotting检测 HIF一1o、【SDF-lo~、CXCR4蛋白表达水平。 果]同常氧组比较，缺氧组HIF-lct、SDF-la、CXCR4mR_NA及蛋白表达水平提高(P005)；同转染 ControlsiRNA组比较，转染HIF一1“siRNA常氧培养组HIF-lu、SDF-lct、CXCR4mRNA及蛋白表达水平降低(Po．05)；同缺氧组比较，转染 HIF-le~siRNA缺氧培养组HIF—la、SDF一1d、CXCR4mRNA及蛋白表达水平降低(P0．05)。f结论】缺氧可使MSCs的HIF一1d、SDF一1d、CX— CR4的表达提高，常氧与缺氧条件下抑制HIF一1d的表达可使SDF-lct、CXCR4的表达降低，HIF一1n在间充质干细胞中对SDF一1／CXCR4有调 控作用。 关键词 ：缺氧诱导因子一10【；间充质干细胞；基质细胞衍生因子一1d；CXC趋化因子受体 4；RNA干扰 中图分类号：R329．2 文献标识码：A 文章编号：1oo5-55 (2014)03-0237-06 TheStudyoftheRegulationofH1F-laforSDF—l，CXCR4inMesenehymalStem CellsZhouLiping，YuQin，LiuLizhen2,etalJ．Instituteof Bioengineering,ZhejiangChineseMedicalUniversity,Hangzhou(3l0o53 Chino；2．BoneMarrowTransplantationCenter,TheFirstAffiliatedHospital, ZhejiangUniversitySchoolofMedicine Abstract： m】TostudytheregulationofHIF—laforSDF一1／CXCR4inMSCs． [Methods】MSCswereculturedbyadherencemethod．HIF一1口 siRNA wastransfectedtoMSCsbySuperFectinMT II．Theexperimentwasdividedintofivegroups，normoxiargoup，hypoxiargoup，controlsiRNA rtansfected group，HIF一10tsiRNA tmnsfected normoxicgroup，HIF—lo【siRNA transfected hypoxiargoup．Reversertanscdption—polymerasechain reactionwasutilizedtodetermineHIF—let，SDF一1d，CXCK4mRNA expressioninM SCs．W estem blottingwasemployedtodetectHIF一1d，SDF—let， cxcR4proteinexpressioninMSCs．fResult]Comparedwi山 thenormoxiargoup，HIF一1d，SDF一1dandCXCR4mRNAandproteinepxression increasedinthehypoxiagroup(PO．05)．ComparedwithhtecontrolsiRNA tra