《两面针与混伪品及近缘种DNA条形码鉴定研究》.pdfVIP

南方农业学报 JOURNALOFSOUTHERNAGRICULTURE 2014，45(1)：12—17 ISSN2095—1191；CODENNNXAAB http：／／www．nfnyxb．cn DOI：10．3969~：issn．2095—1191．2014．1．12 两面针与混伪品及近缘种DNA条形码鉴定研究 马新业-，刘 锋 ，詹若挺 ，韩正洲 ，陈蔚文 (广州中医药大学 中药资源科学与工程研究中心，岭南中药资源教育部重点实验室，广州 510006； 华润三九医药股份有限公司 研发中心，广东 深圳 5181lO) 摘要：【目的】探讨DNA条形码技术对两面针真伪鉴定的可行性，为两面针种质资源的鉴定提供参考。 【方法】对 两面针及其常见混伪品和同属近缘种(10种31份样品)进行DNA提取、PCR扩增和双向测序，所得序列经CodonCode Aligner软件处理和人工校对，采用TaxonGap法比较rbcL、tmH-psbA和ITS2等3条序列的物种鉴定力大小；选择适用 条形码在不同物种样品范围内进行分析，检查种内种间距离变化情况。 【结果】ITS2和tmH-psbA两条序列对10个试 验物种的鉴定效率均为100．0％，rbc 实验物种范围内不存在最小种间遗传距离 ；ITS2序列在样品鉴定范围由12个 物种33个数据扩大为33个物种132个数据时，鉴定成功率从100．0％下降至84．8％，种内变异大于种间变异的比例由 71．4％上升至90．1％。 【结论】ITS2和tmH-psbA序列可作为两面针真伪鉴定的标准条形码，实际应用中应注意确定物 种鉴定样品数及种内充分取样。 关键词：两面针；DNA条形码；rbcL、trnH．一psbA、ITS2序列；鉴定效率 中图分类号：R282．5 文献标志码：A 文章编号：2095—119l(2014)叭一0012—06 IdentificationofZanthoxylum nitidum anditsadulterantsand relatedspeciesthroughDNA barcodes MAXin-ye，LIUFeng ，ZHANRuo-ting ，HANZheng-zhou ，CHENW ei-wen (ResearchCenterofChineseHerbalResourceScienceandEngineering，KeyLaboratoryofChineseMedicinalResourcefrom Lingnan／MinistryofEducation，GuangzhouUniversityofChineseMedicine，Guangzhou 510006，China；ChinaResourcesof SanjiuMedicalPharmaceuticalCo．，Ltd．，Shenzhen，Guangdong518110，China) Abstract：O【bjective】IdentificationofZanthoxylumniddumanditsadulterantsandrelatedspeciesthroughDNAbar- codeswasstudiedtoprovidereferencesforidentifyinggermplasmresourcesofZ nitidum．M【ethod]DNAextractedfrom31 samples(10species)wasamplifiedusingPCRandsequencedbidirectionally．Theobtainedsequenceswereprocessedbythe softwareofCodonCodeAlignerandcheckedbyproofreaders．SpeciesidentificationstrengthofthreecandidateDNAbarcodes