磷酰氨基酸的酯交换反应研究.pdfVIP

、 维普资讯 $ j 、 ． ． 有机化学 YOUJ】HUAXUE11995，15，30~34 研究论文 三汐一 L{， 磷酰氨基酸的酯交换反应研究 谭 波 赵玉芬 0巧 ’ _ - 。 一 ■ 。- _ 。一 (清华大学化学系，北京，100084) A摘要：本文利用-PNMR，对比研究了磷酰化组氨酸与其它磷酰化氨基酸和一级醇的磷上酯交换的反应速 度，实骏表 明磷酰化组氨醢的反应速度最快 由此提出了以下机理：由于眯唑环的参与，磷可以形成六配位过渡 态，从而加快 了反应速度。 美镡词：磷酰化组氪酸， - - - ,．- ．．．,．st -- - - 配位过渡态，磷上登垄苎基坐 弛欲 1 引言 真核生物和原核生物中的核糖体 RNA分子，是由原始转录子裂解而形成的。前体 RNA的 剪接过程可根据攻击上游剪接部位磷酸酯键的进攻基圃的不同而分为两类，第一类由内含子的一 个专一的腺苷酸的 2-OH 进攻的 “，第二类是 由外部的鸟核苷的羟基来进攻的，这一类 RNA 自剪接过程是由Cech发现的，这一发现证明RNA具有高度专一的催化活性，而不管哪一类剪 接过程，其本质都是羟基对磷发生了亲核进攻 ～ ，发生了磷上酯交换反应，因此研究生物体条 件下的磷上酯交换反应是十分重要的。 组氨酸在酶中的作用是十分重要的，它的侧链眯唑环是许多酶的活性中心，如丝氨酸蛋白 酶 。因此研究咪唑环在催化过程中所起的特殊作用，有助于揭示大分子酶的作用机理。 本组多年从事于磷酰化氨基酸的台成及性质研究，研究发现 一磷酰氨基酸在温和的条件下 可 自发地发生一系列仿生化过程，如成肽、成酯、磷酰基转移及磷上酯交换等等，其中，尤以磷 上酯交换反应最为 人『注 目。 一磷酰氨基酸的磷上酯交换产物已被发现并分离 “，本文将重点 阐述 Ⅳ一磷酰组氨酸及其它磷酰氨基酸与一级醇发生交换反应的基本规律，并对该交换机理提出 设想 。 2 实验 研究表明许多磷酰化氨基酸都能发生一些仿生化的反应 ，室温下发生的磷上酯交抉反应 就可以与 RNA的自剪接过程相类比。采用这种模型化舍物来研究磷上酯交换反应，有助于更精 确地把握在反应中起关键作用的基团，探讨它们的行为。但以前的研究只是对于单个的磷酰化氨 基酸能否发生磷上酯交换反应给出一个定性的判断 。为了进一步研究磷酰化氨基酸的侧链基团 对磷上酯交换反应速度的影响，揭示磷上酯交换反应的机理，我们对 比研究 了二异丙基磷酰化的 丙氨 酸 、苯 丙氨 酸 、甘 氨 酸、亮氨酸 和组氨 酸 (简 写为 DIPPAIa、DIPPPhe DIPPGIy、 DIPPLeu、DIPPHis)与一级醇的磷上酯交换行为，以期发现氨基酸的侧链基团对磷上酯交换速 度的影响。具体实验是将 以上五种磷酰化氨基酸 (DIPPAA)分别取 30～50rag与甲醇和丁醇 的混合醇 摩【尔比 l：1)0．3mL在核磁管中反应，于 40℃恒温水浴进行加热，以模仿生物体中的 993—O7—26收稿，1994-02-23修回 维普资讯 第 1期 磷酰氨基酸的酯交换反应研究 ‘3l 条件，每 隔一定时间用定量 PNMR谱 图跟踪 ，以20％磷酸为外标 ，所用仪器为 日本产 JEoLFX-90核磁共振仪 原 料 DIPPAIa、DlPPPhe、DIPPGly、DIPPLeu、DIPPHis的合成参 照 文献 ～ ： “PNMR谱图跟踪磷上酯交换反应速度时仪器的常数设置如下：