红细胞血型血清学试验.docVIP

红 细 胞 血 型 血 清 学 试 验 安徽省合肥市第一人民医院输血科 林正民 江建锋 陈玲 梁晓浏 IgG抗A（B）测定 【原理】 血清以巯基乙醇（2-mercaptoethanol,简称2-me）处理后，IgM抗体分子裂解为6-7 S 亚单位。此种亚单位虽然仍保持与抗原结合的能力，但已失去与相应红细胞凝集的作用。IgG抗体分子则不被2-me灭活，保持与相应红细胞致敏的血清学特性。IgA抗体分子可部分被灭活（7S亚单体不受影响，9 S及11 S多聚体被灭活）。 【试剂】 1、0.2mol/L 2-巯基乙醇应用液 取巯基乙醇1.6ml以pH 7.4 PBS（KH2PO4 1.73g, Na2HPO4·12H2O 19.35g, NaCl 8g加蒸馏水至100ml）稀释到100ml，分装安瓿，每支1ml或2ml,冰箱保存备用。 2、受检者血清。 3、5%A型和B型红细胞PBS（或生理盐水）悬液。 4、抗人球蛋白血清。 【操作】 1、吸取受检者血清0.4ml，加2-me应用液0.4ml，混合，将试管口塞紧，置37℃水浴中2h。 2、排列小试管（10mm×60mm）两排，每排10支，第一排每管各加pH 7.4的PBS 0.4ml。 3、第1排第1管加2-me处理血清0.4ml，混合，吸出0.6ml，移0.2ml至第2排第1管内，其余0.4ml移入第1排第2管内，混合。以此类推，作倍量稀