真养产碱杆菌利用葡萄糖生产聚β—羟基丁酸的摇瓶发酵条件.pdfVIP

维普资讯 第 17卷 无 锡 轻 工 大 学 学 报 Vo1．L7 第 1期 JOURNALOFWUXIUNIVERSITYOFLIGHTINDUSTRY l998No．1 真养产碱杆菌利用葡萄糖生产 聚B一羟基丁酸的摇瓶发酵条件 堵 国成 陈坚 尹洪波 高海军 伦世仪 ～ 一 J (无锡轻工大拳，生物工程学院．无锡214036) 1 f6D ’ 摘要 咀葡萄糖为碳源，时真养产碱轩茵生产 pHB的 瓶发酵奈件进行 了撂索。 研究结果表 明，在摇瓶补料奈件下 ，细胞干重和PHB质量浓度可分别达到35．1 g／l一和 28．3g／i，PHB对葡萄糖的产率系数-；-s0．36g／g． 、． 董中苎囤妻分类号查TQ929；补料；生物材料； 兰 ；苎塑苎苎 ’1勤 O 前 言 聚 羟基丁酸 (PHB)是许多微生物在营养不平衡条件下积累的一类可作为 自身碳源和 能源 的胞 内聚合物 j。由于PHB在具有与合成塑料聚丙烯相似性质的同时，还具有生物可 相容性和生物可降解性0]，因而正成为 目前开发生物可降解材料的研究热点之一 。但与化工 合成的塑料相 比，PHB的生产成本很 高口]，所 以许多研究人员一直致力于提高 PHB的生产 强度 和采用新的提取技术的研究，以期降低生产成本 ，提高市场竞争力。 真养产碱杆菌 (．eutrophus)具有易于培养、生长快和能在简单的合成培养基中积累 大量的PHB(达细胞干重的 80 以上)的特点_]‘，已被广泛应用于 PHB的生产和研究过程。 本世纪8O年代中期 ，英国帝国化学公司(ICI)以A．eutrophus的突变株为生产菌种 ，以葡萄 ‘ 糖为唯一碳源率先实现 了PHB的工业化生产。本研究室在前一阶段 的研究中，采用 ． eutrophusATCC17699以丁酸为碳源进行了PHB合成的研究 ，结果发现该菌株利用丁酸 为碳源培养 ，细胞干重和 PHB含量可分别达 7．2g／L和 72．2 IS]，但该菌株利用葡萄糖 的 能力很差。 作者采用能利用葡萄糖为碳源的真养产碱杆菌为生产菌株，以提高菌体细胞干重和胞 内PHB吉量为研究 目标 ，进行了PHB摇瓶发酵条件 的研究和优化 ，并由此指导了在2升台 式发酵罐进行的PHB初步生产。 1 材料与方法 1．1 菌种 真养产碱杆菌A．euDo‘phusWSH3(本研究室保藏号) 蓑磊昔舂嚣 第一作者：堵昌威 ．男，1965年 10月生、博士生 I ： ， 维普资讯 第 1期 堵国成等 ：真养产碱杆菌利用葡萄糖生产聚 羟基丁酸的摇瓶发酵条件 15 1．2 培养基 12．1 斜面培养基 (g／I) 酵母膏 1O，蛋 白胨 10，牛肉膏 5 (NH )SO 5，琼脂 2o； pH 7．0． 12．2 无机 元 素 液 (I )‘ NazHPO4 ·7H2O 8．9g；KH2PO4 1．5g；MgSO · 7HzO 0．2g；柠檬酸铁铵 60mg；CaCI2·2H O 10mg；及 1ml微量元素液 ，内含 ：H BO 0．3g，CoC12。6H2O 0．2g，ZnSO4 ·7H2O 0 1g，M nCI2·4H2O 30mg，NaMoO。· 2H。0 30mg，NiC]2·6H}O 20mg，CuSO ·jH!() 10mg． 1．2．3 种子培养基 (g／I) 酵母膏 lO，蛋白胨 1叽 牛肉膏 5．(NH{)2SO 5；