雷替曲塞对人胃癌裸鼠移植瘤生长影响及机制与研究.pdfVIP

中文摘要 雷替曲塞对人胃癌裸鼠移植瘤生长的影响及其机制的研究 摘 要 目的：胃癌是在世界范围内排名第四位的常见恶性肿瘤，每年有100 万的新发病例，其中将近70％发生在发展中国家。2007年，全球范围内 大约有80万人死于胃癌。我国胃癌平均年死亡率约为25．2／10万人口。5． 氟尿嘧啶(5-Fu)在胃癌的化疗中应用广泛，常需连续或持续静脉滴注， 应用不够方便。埋置中心静脉导管解决了此问题，但埋置中心静脉导管同 盐类似物，为一种新型的水溶性胸苷酸合成酶(TS)抑制剂。它无需亚叶酸 钙增效，使用方便。目前雷替曲塞主要应用于晚期结直肠癌患者的治疗。 在胃癌的研究中，雷替曲塞联合其它细胞毒性药物的临床试验显示是有效 的，但尚缺乏大规模临床试验证实。雷替曲塞在胃癌的应用上还值得进一 步研究。本研究拟通过建立人胃癌细胞MGC．803裸鼠皮下移植瘤实验模 型，分别给予雷替曲塞、5．Fu、生理盐水药物干预，初步探索雷替曲塞对 人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其机制。 方法：l、建立人胃癌细胞MGC．803裸鼠皮下移植瘤模型。2、实验 分组及药物干预：将24只成瘤裸鼠模型随机分组为雷替曲塞组、5-Fu组、 给药5天。监测各组裸鼠体重变化，同时观察裸鼠精神状态、饮食、大便 情况。3、评价抑瘤作用：每隔3天用游标卡尺测量裸鼠肿瘤长径(A)和垂 直横径(B)，按公式V=AxB2／2计算裸鼠肿瘤体积，并绘制肿瘤体积增长 曲线。给药休息2天后，全部裸鼠脱颈椎处死，立即剥离肿瘤，并对肿瘤 进行称重，计算抑瘤率，抑瘤率=(对照组瘤重．实验组瘤重)尉照组瘤重 *100％。4、流式细胞仪测定瘤细胞的周期分布和凋亡。5、采用RT-PCR、 Western blot印迹法检测各组肿瘤p53mRNA及p53蛋白的表达水平，并 比较三组之间的差异。6、统计分析：采用SPSS13．0软件对各组数据进 行统计分析。计量数据以i士s表示，多组样本间均数比较采用单因素方差 ANOVA)分析，PO．05为差异有统计学意义。 (One．way 中丈摘要 结果： 1荷瘤裸鼠体重：雷替曲塞组、5．Fu组和对照组裸鼠体重分别为： 重均明显低于对照组体重，统计学有显著性差异(脚．01)。且5．Fu组裸鼠 体重低于雷替曲塞组裸鼠体重(PO．05)。 2荷瘤裸鼠瘤体体积：雷替曲塞组、5-Fu组和对照组裸鼠瘤体体积分 mm3、706．14_+64．42min3、1232．02±109．69IIlIll3， 别为：657．894-59．47 对照组裸鼠瘤体体积明显高于雷替曲塞组和5．Fu组，统计学有明显差异 俨o．01)，但雷替曲塞组和5．Fu组瘤体体积之间无统计学意义po．05)。 3荷瘤裸鼠瘤重及抑瘤率：雷替曲塞组、5．Fu组和对照组裸鼠瘤重分 瘤重均低于对照组瘤重，统计学有显著性差异俨o．01)。但雷替曲塞组和 率分别为49．02％、45．75％。 4荷瘤裸鼠瘤细胞的细胞周期分布和凋亡：雷替曲塞组和5-Fu组瘤细 胞的G0／G1期比例较对照组比例明显减低∽0．01)，而S期比例较对照组明 组G2／S期比例之间无统计学差异(Po．05)。三组之间的凋亡率有统计学意 义。与对照组的凋亡率相比，雷替曲塞组和5．Fu组的瘤细胞凋亡率显著高 俨《o．05)。 mRNA相对表达量为：0．521±O．046； 5雷替曲塞组中裸鼠肿瘤p53 5．Fu组中裸鼠肿瘤p53 mRNA相对表达量为：0．1 肿瘤p53 59±0．025。雷替曲塞组裸鼠肿瘤p53蛋 4-0．021。与 0．474_-l-0．034；对照组裸鼠肿瘤p53蛋白相对表达量为：O．193 mRNA和蛋白表达水平显 对照组相比，雷替曲塞组和5．Fu组裸鼠肿瘤p53 mRNA和