1分子生物学常用技术.ppt

分子生物学常用技术 核酸的分子杂交 Nucleic acid hybridization 分子杂交的形式： 液相杂交 固相杂交 它们之间的区别和优劣 固相杂交的一般过程 1.首先设计、合成探针。 2.收集标本，并提取核酸。 3.将提好的核酸样本点到固相支持物上。 4.封闭。 5.通过变性和复性完成杂交。 6.漂洗 7.放射自显影 核酸分子杂交技术的演变 斑点杂交 southern blot northern blot 原位杂交 芯片技术 斑点杂交 southern blot southern blot 原位杂交 染色体原位杂交 组织切片上的原位杂交 芯片技术 芯片技术的基本原理： 可以将所有已知的某一类核酸信息制备成探针，通过现代化的技术将其集中安放在一块特殊材料上（如硅片或其它材料上）。 用芯片来与标本DNA进行杂交。 将杂交结果通过计算机软件进行分析，得出结论。 GeneChip? Array Construction 芯片技术的基本条件： 所有探针的信息（核酸序列）必须是已知的。 已知信息（生物信息）的数量要足够多。 制备芯片需专用的设备。但有商品可供选