津力达颗粒对调脂诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗影响研究.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………………4 英文缩写………………………………………………………………………8 研究论文津力达颗粒对高脂诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗影响的研究 前言………………………………………………………………………9日IJ吾…………………………………………．…………………………．． 材料与方法……………………………………………………………9 结果……………………………………………………………………25 附图……………………………………………………………………27 附表……………………………………………………………………33 讨论……………………………………………………………………37 结论……………………………………………………………………42 参考文献………………………………………………………………43 综述 二酰甘油与人类骨骼肌组织胰岛素抵抗关系的研究进展………46 致谢…………………………………………………………………………53 个人简历……………………………………………………………………55 万方数据 中文摘要 津力达颗粒对高脂诱导的ttepG2细胞胰岛素抵抗影响的研究 摘 要 胰岛素抵抗(IR)是2型糖尿病及多种代谢性疾病的共同病理生理基 础。而氧化应激是引起IR的关键性因素。既往有研究表明，复方制剂津 力达(由人参、黄精、苍术、苦参等17味中药组成)可有效降血糖，改 善2型糖尿病患者的症状，并具有保护胰岛p细胞、增加胰岛素分泌、改 善IR的作用。但其具体机制尚不明确，本研究拟通过观察津力达在体外 细胞水平对高脂诱导的HepG2细胞IR的影响，探讨其改善IR的机制， 为临床用药提供理论依据。 目的：观察中药复方制剂津力达对高脂诱导的HepG2细胞胰岛素抵 抗以及氧化应激的影响，探讨津力达改善胰岛素抵抗的机制。 方法：采用高脂(含0．25 mmol／L棕榈酸培养基)干预法建立HepG2 细胞胰岛素抵抗模型。HepG2细胞随机分为2组，正常对照组和高脂培 养基组，分别干预24小时后采用葡萄糖氧化酶法测定培养基中葡萄糖浓 度，计算葡萄糖摄取率，判断造模成功。造模成功后将高脂培养基组随机 度为0．2 mg／mL)、 mg／mL)、津力达低剂量组(JLD．L)(津力达浓度为0．75 津力达中剂量组(JLD．M)(津力达浓度为1．5mg／mL)和津力达高剂量 组(JLD．H)(津力达浓度为3．0 mg／mL)，同时设立正常培养基对照组 (Con)，二甲双胍为阳性药物对照。分别干预48小时后收集细胞，采用 相应试剂盒测定各组HepG2细胞氧化应激相关指标，即还原型谷胱甘肽 染色检测HepG2细胞活性氧簇(ROS)的含量；Real．TimePCR检测HepG2 (GLUT2)的mRNA表达水平；Westem 活化蛋白激酶(p38MAPK)的总蛋白及磷酸化蛋白水平。 万方数据 中文摘要 结果： 1HepG2细胞的胰岛素抵抗体外模型建立 差异有统计学意义(火O．05)，胰岛素敏感性下降，表明用软脂酸诱导胰 岛素抵抗体外细胞模型成功建立。 2MTT法检测干预对HepG2细胞增殖的影响 均能提高HepG2细胞增值率(尸O．05)，但未能恢复至Con组水平。 3HepG2细胞胰岛素敏感性的变化 (1)胰岛素信号通路相关指标基因表达水平的变化 GLUT2的mRNA表达(氏O．05)，但未能恢复至Con组水平。