PrxVI在大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型肺内的表达变化.pdf

中文摘要 PrxVl在大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型肺内 的表达变化 摘 要 肝脏是机体内重要的代谢器官，不仅参与蛋白质、脂肪等重要物质代 谢，还具有排泄、分泌、解毒等功能。因此，肝功能发生异常不仅会导致 代谢紊乱还会引起其他重要器官的功能受损。肝脏的缺血再灌注损伤 ischemia (hepatic reperfusioninjury，HIILl)是肝脏外科手术如肝脏移植、 肝部分切除等过程中经常遇到的病理生理现象。有研究表明：HIRI的发生 是导致肝功能衰竭，手术失败，病人愈后较差的重要原因。 oxygen 非常活泼，可以与细胞内和胞膜的重要结构蛋白、功能蛋白发生过氧化反 应，改变细胞膜的结构，影响细胞功能，甚至引起细胞和组织死亡。肺脏 是机体内对氧含量非常敏感的脏器之一，当HIRI发生时，是否会引起远端 脏器肺脏也处于氧化应激状态，遭受过氧化损伤? 成员之～。PrxVI在哺乳动物肺部尤其是肺泡II型上皮细胞表达非常丰富。 研究表明：PrxVI具有谷胱甘肽过氧化物酶的生物活性，其功能主要是负 责还原H202和磷脂过氧化物等。用高浓度氧、百草枯、H202等物质处理 大鼠肺上皮细胞引起氧化应激反应后，PrxVI的mRNA和蛋白水平会明显 增强。当诱导PrxVI在肺上皮细胞系过表达时，能明显增强细胞分解H202 的能力，抑制细胞过氧化反应的发生。说明：PrxVI在清除ROS，防止肺 组织过氧化损伤中可能发挥重要作用。当肝脏缺血再灌注损伤发生后， PrxVI的表达水平如何改变?未见报道。 本研究通过无损伤血管夹夹闭通往大鼠肝左叶、肝中叶的血管和胆管 蒂30min后松开血管夹，制造大鼠70％肝脏缺血再灌注损伤模型，然后观 灌注损伤后肺内的氧化应激状态以及PrxVI的抗氧化作用 万方数据 中文摘要 目的：观察大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型肺内的氧化应激水平以及 PrxVI mRNA和蛋白表达水平的改变，探讨其在肺内氧化应激反应中发挥 的作用。 方法： 1肝脏缺血再灌注损伤模型的制备及取材 肝血管和胆管蒂，以无创伤性血管夹夹闭通往肝左叶、肝中叶的血管和胆 管蒂。30分钟后去掉血管夹，恢复肝脏血液供应，制造70％肝实质的肝 脏缺血再灌注损伤模型。对照组大鼠只分离血管和胆管蒂并不夹闭。6小 时后收集血液，用于√岍(丙氨酸氨基转移酶)测定；处死大鼠取肝脏和 肺，肝脏于4％多聚甲醛中固定进行HE染色，观察肝组织的形态学改变， 肺组织置于液氮中用于PrxVImRNA水平、蛋白水平测定以及MDA含量 测定。 2测定指标及方法 2．1HE染色观察大鼠肝脏形态结构 肝组织经常规脱水、透明，石蜡包埋后，切片厚约59m，苏木精伊 红染色，日本产Olympus光学显微镜下观察肝组织形态变化并进行图象 分析。 2．2血清ALT水平测定 生化分析仪测定。 2．3肺匀浆的制备和MDA含量测定 IIl加入预冷的匀浆缓冲 从．70。C冰箱中取出肺组织，按照10mg／100 PMSF， 0．1％Tween-20，0．5mol／Lmmol／LEDTANa3，5mmol／L NaCl．1 B．巯基乙 4。C离心20min，取上清即制成10％肺 醇)，冰浴中匀浆，匀浆液4000rpm 组织匀浆，肺组织匀浆内MDA含量经南京建成丙二醛(MDA)测定试剂盒 测定 2．4大鼠肺组织PrxVImRNA水平测定 万