乌骨鸡多肽产品质量指标及黑色素提取和含量测定的研究.pdf

摘要 摘要 乌骨鸡(Gallusdomesticus gallus brisson)属于鸟纲、鸡形目、雉科、鸡属， 是我国特有的药用保健鸡种，主要产于江西省泰和县武山。作为传统中药，既 可单独食用又可配药入复方，具有补肝肾、益气血、退虚热、治心腹痛等功效。 在《本草纲目》中记载：乌骨鸡药用效果与鸡皮、肉、骨的黑色深浅有关， 其颜色愈深者，入药愈佳。由此可见乌骨鸡的独特作用与体内的黑色素有一定 关系。当今发展鸡肉深加工是鸡肉加工业的必然趋势，利用酶技术处理鸡肉是 提高其资源利用率和附加值的一种有效途径。就文献和市场调查结果可知，目 前还没有乌骨鸡活性多肽类及黑色素的产品，特别是乌骨鸡黑色素产品检测手 段发展缓慢，使开发乌骨鸡黑色素产品受到一定的阻碍。基于前人的研究成果 和乌骨鸡的研究现状，本文对乌骨鸡多肽产品的营养成分和理化指标进行测定。 并通过比较不同提取方式对乌骨鸡黑色素产物的影响，确定合理的黑色素提取 方式。同时建立可靠、稳定的乌骨鸡黑色素含量分析方法。为乌骨鸡多肽及黑 色素新产品和基料开发奠定了应用基础，其主要研究结果概括如下： 1．对三种乌骨鸡生物多肽中总蛋白和游离氨基酸含量等产品理化质量指 标进行测定，为建立三种乌骨鸡生物多肽产品质量标准奠定基础。检测结果可 见三种乌骨鸡生物多肽干基基料中总蛋白质含量分别为94．304-0．36％、 见产品中蛋白质含量丰富，多肽含量高，属于一种高营养的蛋白来源。 2．建立凝胶色谱法对三种乌骨鸡生物多肽的重均分子量、数均分子量和分 column 子量分布进行探讨。凝胶色谱条件为：色谱柱：Saphadexpeptide 10／300GL(300 mm×7．8Ⅱ吼)；流动相：磷酸盐缓冲溶液(0．01mol／LNaH2P04； mL／mim Ⅱ 摘要 进样体积：20m：检测波长设为220nnl。使用GPC软件进行数据处理，根据 fv． 一阶拟合线性回归所得到分子量标准曲线方程为：LogMw=．0．184V+5．70 洗脱体积、R=0．995)。多肽分子量大小与其洗脱体积的线性很好，适宜多肽产 品分子量的测定。 3．通过电镜扫描、ICP．AES、红外扫描、抗氧化体系等对盐酸水解和蛋白 酶酶解所得乌骨鸡黑色素进行观察和比较。结果表明，蛋白酶酶解法提取乌骨 鸡黑色素能较好保持其原有结构和保留所含微量元素，可认为是较为理想的提 取乌骨鸡黑色素的途径。蛋白酶对肌肉蛋白水解温和，残留蛋白质含量较高， 但另一方面温和水解对椭圆的乌鸡黑色素颗粒不造成破坏，而盐酸处理会使黑 色素形成不定形结构。乌骨鸡黑色素中含有大量矿物质和微量元素。盐酸提取 黑色素中的元素含量明显较蛋白酶提取黑色素低，且蛋白酶提取的黑色素较盐 酸提取的黑色素有更强的抗氧化能力，这些都可能与其结构没有被破坏有关。 可见蛋白酶酶解提取乌骨鸡黑色素是较为合理的提取方法。 4．采用HPLC．MS鉴定乌骨鸡真黑色素氧化后产物中的2，3，5．三羧基吡咯 (PTCA)，并建立HPLC法测定乌骨鸡真黑色素氧化后PTCA含量，经试验确． rain×4．6 定色谱条件为：色谱柱为KromasilC18(250 mm，5岬)；检测波长 为270 nlTl；进样量为20此；流动相A：l％甲酸，流动相B：甲醇，梯度洗 脱；流速为0．5mL／min。实验测得乌骨鸡真黑色素与PTCA含量间换算关系为： 真黑色素=62．89xPTCA(mg)。对蛋白酶提取乌骨鸡黑色素中真黑色素含量测定 结果可见黑色素含量约为63．19％。 关键词：乌骨鸡；黑色素；PTCA；多肽。 il