新型纤维蛋白骨架复合材料的制备及其生物传感应用.pdf

密级 学校代码 !Q5垒2 新型纤维蛋白骨架复合材料的制备及生物 传感应用 and of Preparation biosensingapplications novelfibrin--boned composites 研 究 生姓名 韩芳芳 指导教师姓名、职称 傅迎春副教授 学 科 专 业 分析化学 研 究 方 向 生化分析与生物传感 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一四年五月 中文摘要 高效固定生物识别分子是研制生物传感器的关键步骤之一，开发 新型固定基底研制多功能纳米复合物并应用于生物大分子高效固定 是当前生物传感研究的热点与前沿。在凝血过程中，凝血酶使分散 性好的纤维蛋白原链断裂生成难分散的纤维蛋白，后者聚集成团并 包埋多种其它物质而形成多孔的三维网状结构。生理凝血所得纤维 蛋白骨架材料具有多孔性、制备可控、表面功能丰富、生物相容性 好等系列优异性质，但鲜有开发用于高效固定基质及生物传感应用 报道。受该生理现象／功能启发，本文中我们制备了几种以纤维蛋白 为骨架的新型固定载体材料，用于高效固定其它生物分子、聚合物 和／或纳米材料，并成功用于高敏电化学生物传感研究。主要工作如 下： 1．基于凝血现象开发纤维蛋白骨架材料作为生物大分子和纳米 材料的高效固定基质并用于高敏葡萄糖生物传感。以葡萄糖氧化酶 们探究了基于该材料固定生物分子和纳米材料的四种方法，及所制 生物／生物纳米复合物对生物分子／纳米材料的负载量、传质效率和生 物催化性能。采用数码成像、紫外可见(Wvis)光谱法、透射／扫 描电子显微技术、电化学方法等表征复合材料的性质和性能。我们 发现，纤维蛋白骨架材料具有系列优异性能，如多孔性、生物相容 性、可控性且自身表面基团丰富，能够有效提高GOx和纳米粒子的 T cm‘2 催化性能。所制备的葡萄糖生物传感器灵敏度最高达145gA mM一，明显高于其它大部分文献报道同类传感器。 2．结合凝血启发的生物聚合和化学氧化聚合，开发同步多聚合 新方法制备新型蛋白骨架．聚合物基多功能生物复合物。在含纤维蛋 白原、GOx和多巴胺(DA)的溶液中，加入凝血酶触发纤维蛋白凝 结，同时加入氧化剂对苯二醌(BQ)引发共存的单体DA的氧化聚 合并在纤维蛋白骨架上沉积，同时原位包埋大量GOx，得到新型聚 合物．生物复合物，藉此研制了高敏葡萄糖生物传感器。考察了所制 生物复合物对生物分子的负载量、传质效率和生物催化性能。所制 传感器灵敏度高(83 cm。2 gA mM‘1)，具有良好的稳定性和抗干扰性。 3．在凝血生物聚合和化学氧化聚合基础上，采用氧化性金属盐 NaAuCl4为化学氧化剂，开发同步聚合新方法制备新型纤维蛋白．聚 合物．酶．纳米金的生物纳米复合物，研制了高敏葡萄糖生物传感器。 该法在聚多巴胺．纤维蛋白凝胶生成过程中在聚多巴胺膜内原位合 成纳米金，同时包埋大量GOx。新法引入了纳米金的优异性质，使 18 GOx的包埋量和活性均有进一步提升，所制传感器灵敏度高(1 gA cm。2