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三种甘蓝型油菜小孢子发生过程中 微管骨架的变化研究 遗传学专业 研究生： 雷远成 指导教师： 李旭锋 摘要 细胞骨架微管结构，是于1963年先后在动植物细胞中被发现的。 现己知道微管不仅具有对细胞的支持功能，而且在细胞运动、物质运输和分 泌、细胞的信息传递，以及在有丝分裂染色体移动等一系列细胞活动中发挥 重要作用。 目前，国内有关微管方面研究工作还很少，植物微管则更少，而且多为 单子叶植物，利用免疫荧光共聚焦激光扫描显微技术，研究双子叶植物油菜 小孢子微管细胞周期时相，为研究双子叶植物油菜小孢子细胞周期中染色体 的分裂行为及其遗传变异提供依据。 本文主要对甘蓝型油菜萝h胞质不育系(OguCMS)恢复材料Ad一6(F5)、 甘蓝型油菜萝h细胞质雄性不育系(OguCMS)、甘蓝型油菜萝h胞质不育恢 复材料测交F5(TCl)代小孢子发生过程中微管骨架的变化进行了研究。微 管在细胞内处于动态变化之中，并具有低温解聚的特点，能否保持真实的微 管构型与采用的方法密切相关。本文实验采用的是游离细胞酶解涂片技术 法，对新鲜的性细胞组织进行短时间的固定及部分酶解处理，标记荧光强， 且能够观察到细胞内微管骨架的整体构型，是一种简便且成功率高的方法。 在实验中，针对这三种材料的各自花药特点，采用了不同的实验条件，取得 了较好的实验结果。 实验结果表明，甘蓝型油菜萝}胞质不育系(OguCMS)恢复材料Ad一6 (F5)小孢子发生过程中微管骨架的变化同普通甘蓝型汕菜的基本一致，I闸 时也与细胞遗传学研究花粉母细胞减数分裂染色体的行为基本吻合，说l删汕 菜OguCMS恢复材料Ad。6(F5)遗传性状基本上已趋于稳定。在研究甘蓝 型油菜萝b细胞质雄性不育系(OguCMS)小孢子发生过程中微管骨架的变 化，发现花粉母细胞减数分裂的中期II微管骨架的变化中，虽然两子核形成 了纺锤体，然而纺锤体被染色体隔开的两部分大小严重不等，且纺锤体的排 列没有在同一个平面上，这有可能使得其减数分裂后产生的四分体不能正常 发育至单核花粉期，从而导致油菜萝b胞质不育系(OguCMS)的败育。甘 蓝型油菜萝h胞质不育恢复材料测交F5(TCl)代，异常的染色体分裂，在 本实验中观察到的其小孢子形成过程中微管骨架的变化同样表现出一些异 常得到了进一步的证实。 关键词：甘蓝型油菜恢复系萝b胞质不育微管小孢子母细胞减数 分裂 小孢子发生 间接免疫荧光标记共焦显微镜 of of StudiesonthePattern Organization in Microtubules Formation DuringMicrospore L． Three Brassica Species nepus Major：Genetics Student：Lei AdviserLi Graduate Yuaa—Cheng Xu—feng were foundedin AbstractThe andmicrotubules cytoskeleton successively thecellsbutalso in microtubulenot sustain animaland cell1963．111e