伤寒沙门菌质粒pRST98 spv毒力基因和树突状细胞在免疫反应中关系研究.pdfVIP

伤寒沙门菌质粒pRs-mspy毒力基因与树突状细胞奋免疫反应中关系的研究 中文摘要 伤寒沙门菌质粒pR盯蛐spy毒力基因 与树突状细胞在免疫反应中关系的研究 中文摘要 目的：研究伤寒沙门菌质粒pRsT98spY毒力基因与树突状细胞在 免疫反应中的关系，为进一步明确spv在沙门菌致病中的作用机理提 供理论和实验依据。 方法：由于伤寒沙门菌是一种严格只对人类致病的病原体，没有 一个合适的动物模型和有效的遗传学工具，我们利用与其有非常近缘 关系的鼠伤寒沙门菌的研究途径和方法来研究pRsT9sspv毒力基因的 作用。将pRsT9s导入有成熟动物模型和遗传背景明确的鼠伤寒沙门菌 毒力质粒的鼠伤寒沙门菌标准毒株SR-11作阳性对照，RIA低毒株作 阴性对照，进行体内外对比研究。 1．将C57BL／6(B6)纯种小鼠随机分为三组，分别经腹腔注射三 同时间段处死小鼠后取脾脏，分离单个核细胞，流式细胞仪检测DC 的数量及其表面的协同刺激分子CD80和CD86，比较细菌刺激DC 成熟的能力。 2．分别用三种鼠伤寒沙门菌经腹腔注射小鼠，第五天处死后取 伤寒沙门菌质pRs．-瑚s／n,毒力基因与树突状细胞在免疫反应中关系的研究 中文摘要 脾脏，分离单个核细胞，免疫磁珠分选树突状细胞(DC)，此为体内 致敏DC(分别称为DC-SR-I 未接触上述细菌抗原的小鼠脾脏DC，作为未致敏DC。制备三种细 菌的热灭活抗原，分别与相应细菌致敏的DC、未致敏DC在体外共 分泌细胞因子的能力。 3．混合淋巴细胞反应：将体内致敏DC、未致敏DC分别与分离 T 细胞)共培养，3H-TdR掺入法检测DC将抗原递呈给初始型T细胞 并使之活化增殖的能力。 结果：1．经腹腔分别注射三种鼠伤寒沙门菌后，小鼠脾脏中DC 的数量和细胞表面分子CD80、CD86的表达在第2、5、7天逐渐升高， 其程度按RIA、pRsn8／ⅪA、SR-11依次递增。 2．体内致敏DC与相应灭活抗原共培养前后分泌的IFN-q均比未 致敏DC高，而其分泌的IL．10与未致敏DC无差异。两种细胞因子 在三种致敏DC组间无显著性差异。 3．三种体内致敏DC均能刺激naiveCD4+和CD8+T细胞的增殖， l依次递 增。 结论：对伤寒沙门菌质粒pRsT98spy毒力基因与树突状细胞在免疫 Ⅱ 伤寒沙门菌质粒pRg瑚聊毒力基因与树突状细胞在免疫反应中关系的研究 中文摘要 能促进脾脏DC数量的增加并刺激其成熟，表现为DC表面共刺激分子 初始型T细胞并使之活化增殖的能力。以上结果说明沙门菌感染能激 发DC介导的特异性免疫应答，伤寒沙门菌质粒pItST98spy毒力基因与 DC在免疫反应中的作用密切相关。 关键词：伤寒沙门菌；质粒；spv毒力基因；树突状细胞；免疫反应 作 者：李姬渊 指导老师：黄瑞 Ul 伤寒沙门菌质粒pR溯妒v毒力摹因与树突状细胞在免疫反应中关系的研究 onthe between on spv Study relationship gene Salmonella andthedendritic typhiplasmidpRsT98 cellsinimmune