胆道疾病中胰胆反流和肠胆反流现象的观察及其相关性研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 胆道疾病中胰胆反流和肠胆反流现象 的观察及相关性的研究 刖 青 1966年Elmslie首次提出胰胆反流的学说，发现它可引起胆管上皮化生、胆 总管囊肿，可发展为胆管或胆囊癌。胰胆反流还可以破坏胆汁胶态稳定性，推测 与胆石形成有关。胰胆反流常见于胰胆管合流异常(Pancreaticobiliarymaljunction； ofOddi； J等提出， SO)收缩范围，胰液经胰胆管共同通道反流。InagakiM和Horaguchi 在非PBM患者也存在隐匿性胰胆反流，即没有胰胆管合流形态学异常但胰液可反 流入胆管而引起类似PBM的病理改变。 胰胆反流如有肠激酶参与则迅速激活胰蛋白酶原，引起酶级联反应而加速胆 管的刺激损害等一系列病理过程。此过程与十二指肠液反流入胆管即肠胆反流相 似，因此需要区别胰胆和肠胆反流。 诊断两种反流的方法均有改进，如判断肠胆反流通过口服核素后检测胆汁中 放射性活度的方法，判断胰胆反流通过磁共振动态观察胰泌素诱导后胆管直径的 变化等方法，其敏感度和特异度明显提高。但目前尚存在应用范围局限和难以反 映生理性反流等缺点而不能得以广泛应用，因此仍沿用测胆汁中淀粉酶(amylase： AMY)水平的方法，但其特异性较差。 法分别观察各胆道疾病中肠胆和胰胆反流的存在，同时采用蛋白印迹(western 来观察反流现象，并相互对比。用较好的诊断方法研究胆道疾病中两种反流的存 在及与疾病的相关性。 方法 一、实验对象 收集2007年1月至2008年8月，中国医科大学附属盛京医院收治的共151 例胆道疾病患者，包括胆囊结石，胆囊息肉，胆管色素结石，胆管残石，胆总管 囊肿和肝门部胆管癌行经皮经肝胆管穿刺(percutaneouscholangial transhepatic nasobilliary drainage；ENBD)患者。 上述诊断是依据临床症状、放射学，内窥镜检查或手术所见和病理组织学检 查的主要诊断。胆管残石和胆管色素结石组中的结石均呈泥沙样、棕色色素结石。 ENBD管引流的病例行十二指肠镜乳头切开术(endoscopic 其余患者SO完整。 二、标本采集及保存 (一)标本采集 72例胆囊胆汁和3l例胆管胆汁在术中获取，其余的胆管胆汁分别通过T管、 经皮经肝胆管引流(percutaneoustranshepaticcholangial 管引流获取。所有胆汁样本在空腹超过12h时获取。 (二)保存 获得的胆汁立即保存在．80C，直至分析。 三、检测指标 (一)生物化学方法测量胆汁中AMY活力 70 所有胆汁样本用日立71 A生化分析仪，通过Gal．G2．CNP基质法测定AMY 水平。血液内AMY正常值范围为20--115U／L，超过正常值上限判定为胰胆反流。 (二)生物化学方法测量胆汁中LPS的活力 在106例胆管胆汁随机抽取93例、在72例胆囊胆汁随机抽取60例，用日立7170 300U／L，超过正常值上限判定为胰胆反流。 (三)western blot检测胆汁中Trypsin．1 2 上样前处理：去除胆汁内碎石及各种残渣、脱盐洗涤，此后免疫沉淀。 Western blot：检测用ECL化学发光法，25KD水平出现特异性条带者判定为 Trypsin-1阳性。 (四)口服放射性核素后检测胆汁中放射性活度 对42例胆囊切除、胆道探查取石、T管引流术后的患者，入院后放开T管超 过24h，保证T管引流通畅。检查前禁食一夜，口服