地西他滨联合丙戊酸钠对淋巴瘤细胞株Jurkat增殖凋亡影响的实验的研究.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………………………·1 英文摘要……………………………………………………………………………一5 研究论文地西他滨联合丙戊酸钠对淋巴瘤细胞株Jurkat增殖凋亡 影响的实验研究 ．前言………………………………………………………………………………………-·1刖吾………………………………………………………………………………………～1O0 材料与方法………………………………………………………………11 结果………………………………………………………………………………………··16 附图………………………………………………………………………………………··18 附表………………………………………………………………………………………··23 讨论………………………………………………………………………………………··28 结论………………………………………………………………………………………··31 参考文献…………………………………………………………………32 综述恶性淋巴瘤靶向治疗进展…………………………………………”34 致谢………………………………………………………………………………………………43 个人简历……………………………………………………………………”44 中文摘要 地西他滨联合丙戊酸钠对淋巴瘤细胞株Jurkat 增殖凋亡影响的实验研究 摘 要 目的：T细胞淋巴瘤(T-cell lymphoma)是一种来源于T淋巴细胞的 恶性克隆增殖性疾病。目前对其治疗主要是常规化疗，效果差且易复发， 需寻找有效药物及其联合治疗方案以提高T细胞淋巴瘤患者的疗效改善 预后。表观遗传学对肿瘤的治疗作用越来越受到关注，其中主要包括去甲 基化治疗和组蛋白乙酰化治疗。 国内外研究已证实淋巴瘤患者及其细胞系中存在异常的高度甲基化， 5姗(4B基因，S册．1基 经常发生于富于CpG岛的肿瘤抑制基因(如P1 因，P53基因)启动子区，并导致该基因的沉默。同时也发现存在组蛋白 结合，抑制其活性，造成DNA低甲基化，激活抑癌基因引起细胞分化或 凋亡。FDA已经正式批准地西他滨用于治疗骨髓增生异常综合征(MDS)。 化和表达增强，从而抑制肿瘤细胞增殖。丙戊酸钠(sodiumvedproate，V】)A) 从1970年用于治疗癫痫。最近的研究显示，VPA可以抑制组蛋白去乙酰 化酶，调节细胞周期，诱导肿瘤细胞凋亡，和抑制血管生成，对淋巴瘤亦 有抗肿瘤作用。故DAC与VPA两者有联合用药的可能。 为进一步明确地西他滨对淋巴瘤细胞增殖及促凋亡的机制，本实验选 制以及诱导凋亡作用，及VPA与DAC联合对上述作用的影响。并检测 甲基化酶洲T3AmRNA表达的变化，为T细胞淋巴瘤新的治疗方法提 供理论依据。 方法： l常规方法培养人T细胞淋巴瘤Jurkat细胞株，每24小时传代一次。选 用对数期细胞进行试验。 2MTT法检测不同浓度的地西他滨、丙戊酸钠单药及二者联合应用对 中文摘要 的抑制率，联合用药组观察48hJurkat细胞的抑制率，并用金正均公式计 算联合用药是协同作用还是拮抗作用，计算公式为：Q=EAB／ 率。O．85≤Q茎1．15为相加作用，Q艺1．15为协同作用，郢．85为拮抗作用。 3Annexin帅I双染法检测不同浓度的地西他滨、丙戊酸钠单药及二者联 合使用对J证kat淋巴瘤细胞凋亡的影响，药物作用浓度同MTT实验，观察 单药作用24h、48h、72h的凋亡率和联合用药24h的凋亡率； 4半定量RT-PCR法检测地西他滨、丙戊酸钠单药及二者联合用药各组 m][矾A表达的变化：药物作用浓度同MTr实验，观察 Jurkat细胞洲Ts mRNA表达量变化，联合用药作用 单药作用24h、48h、72h