翻译及其调控(药学本科).ppt

图6-24 细胞质膜蛋白的分型 细胞质膜整合蛋白是在粗面内质网（RER）表面的核糖体上合成的，合成后立即插入RER膜中，不是转运到内质网腔内。 仅跨膜一次的Ⅰ型细胞质膜整合蛋白中，含有N端信号肽序列，可被信号肽酶水解。 Ⅱ型细胞质膜蛋白N端信号肽序列，不被酶水解。 Ⅲ型膜蛋白含有多个内部信号肽及停止转移序列，在膜蛋白转运期间依次发挥作用。 （一）翻译起始的调控 真核生物一条mRNA仅编码一条多肽链。但在噬菌体的DNA中，存在基因重叠现象，即同一DNA序列，可利用同一阅读框架阅读两次以上，为二个以上的蛋白质编码； 也可利用同一DNA序列，以不同的框架阅读方式，为不同的蛋白质编码。这种方式对低等生物具重要意义。 第四节 蛋白质合成的调控 成熟mRNA 的结构： 5’帽子（5’-cap, metG），5’－UTR，编码区，3’－UTR，多聚（A）尾部。 5’-met G- 5’-UTR 3’-UTR Coding region -…AAAA-3’ AUG Hairpin (Stem-loop) 顺式阻扼 40s subunit of ribosome 迁移 G/C多，阻扼强 G /C近AUG, 阻扼强 5’UTR结构与翻译起始调控 cap chloramphenicol acetyl Transferase 氯霉素乙酰转移酶 Higher stability 62 kca/mol lower stability 30 kca/mol 1) 30-kcal stem loop only 12 nt downstream of the cap strongly inhibits translation, because it interferes with binding of the 40S ribosome and factors at the cap. 2) 62-kcal stem loop placed 71 nt downstream of the cap completely blocked appearance of the CAT protein. Why? ● UUAUUUAU 重复的拷贝数 与对转录的抑制效应成正比 Poly(A)的长度与增译作用成正相关 PABP 保护 Poly(A)tailer Poly(A)+PABP促进80s核糖体起始复合体的形成 ● poly(A) tailer 稳定mRNA 增译作用 Initiation of translation in Euk. eIF-2 GTP Met Met Subunit Initiation Complex Subunit binding to end of mRNA Met Met ATP ADP + Pi complex 蛋白质磷酸化与翻译起始调控 GDP GTP eIF2b(GEF) (GTP-GDP Exchange Factor) reuse + 40s small subunit + mRNA + Met~tRNAmetI eIF2~GTP eIF2~GDP ＋ eIf-2因子的磷酸化状态对翻译起始复合体形成的调节 控制蛋白质翻译速率 eIF-2b(GEF) ---eIF-2~GDP 必须与GTP交换， 形成eIF-2~GTP ---交换过程需eIF-2b(GEF)参与，提高交换的速度 影响eIF2释放（reuse） eIF-2~GDP eIF-2~GDP~eIF2b eIF-2~eIF-2b GDP GTP eIF-2~GTP~eIF-2b 起始复合体形成 ---当 eIF-2~P 对GDP~eIF-2b(GEF) 亲合力高 对生长因子，癌基因蛋白mRNA分析 ● 在3’ UTR存在富含UA的8Nt保守重复区 (UUAUUUAU相间排列) （表现翻译抑制效应） 除去rich UA repeats mRNA稳定性提高 3’UTR结构与mRNA稳定性调控 mRNA间降解速率的差异 是一种“翻译水平”的调控机制 ---mature mRNA poly(A) + PABP 稳定mRNA, 免于降解 mRNA的稳定性对翻译的调控 ---短效mRNA、迅速降解、快速更新 3’-UTR存在高拷贝的UA重复区 deadenylation decaping mRNA degradation