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N6对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响 研究生：孙振彬 专业：外科学 导师：赵廷宝教授 中文摘要 第一部分 N6对脊髓损伤后神经细胞凋亡作用的实验研究 目的： 研究N6(促神经再生因子复合剂)对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响。 方法 采用Allen’S法经NYU脊髓损伤撞击器制作大鼠急性SCI模型，实验共分4组： 假手术组(A组，只摘除椎板未损伤脊髓)，单纯脊髓损伤组(B组)，脊髓损伤+生理盐 水治疗组(C组)，脊髓损伤斗N6治疗组(D组)。损伤后72h取材，采用HE染色对脊髓 3蛋白的表达；逆转录．聚合酶链式反应 组织进行标记：免疫组化方法检测CaSpaSe 3、Fas、Bax、Bcl2、P53mRNA在脊髓组织中的 (RT-PCR)检测凋亡相关基因CaSpaLse 表达变化，Western．Blot检测各组脊髓组织中凋亡相关蛋白Bcl2的表达变化。 结果： 3 免疫组化结果显示A组Caspase3阳性表达细胞数很少；B组及C组CaspaSe 阳性表达细胞数较A组明显增加(PO．05)；D组较B、C阳性表达细胞数明显减少(P A 组Bcl2大量表达，B、C组明显降低，D组较B、C组明显升高，结果具有统计学意 义。 结论： N6(促神经再生因子复合剂)能明显抑制脊髓损伤后神经细胞的凋亡。 关键词：脊髓损伤，凋亡，N6(促神经再生因子复合剂)，凋亡基因。 第二部分 N6抑制谷氨酸介导培养脊髓神经元凋亡作用的实验研究 目的： 探讨N6(促神经再生因子复合剂)在谷氨酸介导的脊髓神经元凋亡过程中所起的 保护作用。 方法： 取妊娠13d Wistar大鼠的胎鼠，分离出脊髓神经细胞并进行体外原代神经元的纯 化培养，建立谷氨酸对培养细胞的损伤模型，观察加用N6保护后细胞形态的变化， 变化，CCK8检测细胞活性的变化；实验分为3组：对照组(C组)，谷氨酸损伤组(Glu 组)，谷氨酸损伤+N6处理组(N6组)；每组4个平行皿，实验重复3次。 结果： C组凋亡细胞少见；Glu组凋亡细胞明显增加，细胞活性明显降低；N6组凋亡 细胞数明显减少，细胞活性明显增加，结果均有统计学意义(P0．05)。 结论： 促神经再生因子复合剂N6可明显抑制谷氨酸介导体外培养脊髓神经元的凋亡。 关键词：脊髓损伤，细胞培养，凋亡，谷氨酸，促神经再生因子复合剂N6。 2 THEEFFECT OFN6oNTHECELL APOPTOSISAFTER SPINALCORDINJURY zhen bin Post-graduate：Sun Specialty：Surgery Tutor： bao pro．Zhaoting ABSTRACT Part I THEEFFECTOF N6oNTHECELL