异常温度刺激影响心脏疾病Bim相关机制与干细胞移植干预.pdf

IIIl lIIIllI II IIII IIIllll Y1747096 摘要 摘要 背景： 近年来世界范围内极端气候事件频发，如严重冰雪灾害及反常高温暑热等。 极端气候事件导致心血管疾病的病情加重，引起发病率和死亡率增高。针对寒 冷与暑热刺激对心脏疾病产生的具体影响，及其在已有基础病变的心肌组织内 所产生的具体作用，包括相关的细胞生物学、分子生物学机制，尚缺乏系统的 研究报道。在寒冷及暑热环境下，患有心脏疾病个体的心脏功能恶化程度，心 肌组织病变加重的具体病理学与解剖学参数，以及相关生化指标的变化，办需 要进行具体的量化分析。以便为明确寒冷及暑热刺激下心血管疾病的变化规律 提供参考数据和资料。 心肌细胞损伤可体现在许多方面，包括细胞结构完整性破坏、线粒体能量 代谢障碍、细胞内活性氧自由基(ROS)爆发、钙离子超载以及细胞凋亡改变等。 冷／热刺激所造成的心肌细胞损伤，可能在上述各个方面有所体现。对冷／热刺激 所造成心肌细胞损伤的方式进行观察分析，有助于在细胞水平展现冷／热刺激加 重心肌病变的特点及规律。 心肌细胞凋亡是心肌损伤的重要病理进程之一。线粒体跨膜电位△、I，m下降 则是细胞凋亡级联反应过程中的起始事件。△、I，m崩溃导致电子传递链中断，氧 化磷酸化停止，最终改变细胞电化学氧化还原状态并引起细胞凋亡蛋白酶 热刺激导致心肌细胞损伤是否与线粒体途径有关，需要研究证实。细胞内ROS 爆发是心肌细胞损伤和凋亡的重要机制，而对于冷／热应激是否引起心肌细胞内 ROS爆发，及其可能机制尚不明了。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 不同的亚单位组成。其中最主要的是nox．1、p22．phox。冷／热应激在心肌细胞中 验加以探讨。 广泛分布于机体各种组织，与细胞凋亡的调控功能有关。在不同的组织细胞， 摘要 以及不同的凋亡诱导条件下，Bim蛋白表达的调节机制可能不同。目前，关于 Bim蛋白在心肌细胞凋亡中所起到的作用尚报导不多。作为调节细胞凋亡的关键 蛋白之一，Bim在冷／热刺激诱导的心肌细胞凋亡进程中，也极可能发挥着重要 调控作用，并可能影响到心肌细胞结构完整性的维持、线粒体能量代谢、细胞 内ROS的产生、钙离子超载等诸多方面。探究冷／热刺激下Bim介导心肌细胞损 伤的机制，将对从凋亡角度深入认识冷／热刺激诱导心肌细胞损伤的具体机制， 产生重要理论意义。 Bim可能与多种经典的凋亡相关信号通路有着密切关联。明晰冷／热刺激下 Bim介导的心肌细胞损伤的信号传导途径及关联，可能在分子生物学水平提示新 颖而有效的治疗干预靶点。Bim对心肌细胞凋亡的调控可能涉及众多信号分子途 参与调节冷／热刺激诱导心肌损伤，及其与Bim表达的关系，目前尚未见报道。 故此，Bim蛋白在冷／热刺激诱导心肌损伤中的作用机制以及调节机制，以及Bim 究内容。 干细胞移植修复心肌损伤的效果，已经众多实验与临床研究证实。骨髓问 充质干细胞(BM．MSCs)是目前常用于细胞移植治疗的组织工程种子细胞。 BM．MSCs可能通过多种途径改善并恢复缺血梗死状态下的心肌功能。在极端气 候条件下，对已有基础缺血病变的心肌组织预先行BM．MSCs移植干预，是否能 够提升其对极端气候条件的耐受性，及其潜在的具体机制，尚未有研究涉及， 也作为本研究探讨的内容之一。 方法： 在RXZ．300A型智能人工气候箱的基础上，建立模拟寒冷／暑热环境的模型 装置。对兔。Ii,肌梗死动物模型进行寒冷／暑热干预。实验分组：I、常温组(MI)， 变化情况；超声心动图测定心脏功能；生理记录仪测定血流动力学指标；梗死 区心肌组织切片苏木精．伊红(HE)染色评价病理学改变：Real．timePCR法检测心 肌组织内iNOS和eNOSmRNA表达水平；westemblot检测梗死区心肌组织Bim 蛋白的表达水平。同时，对大鼠心脏肥大模型进行寒冷／暑热干预。实验分组：