《5种荧光染料探针与牛血清白蛋白相互作用研究》.pdfVIP

第28卷第2期 分子秤学学报 V01．28No．2 OF 2012年4月 JOURNALMOLECULARSCIENCE 2012 April [文章编号]1000—9035(2012)02—0129-05 5种荧光染料探针与牛血清白蛋白相互作用研究 郭彦青1，景顺杰1，卫艳丽2，董川b2 (1．晋中学院化学／l：-c学院，山西晋中030600； 2．山西大学环境科学与工程研究中心，山西太原030006) [摘 要] 采用荧光光谱法研究了水溶液中四溴荧光素、四氨四澳荧光素、二碘荧光素、乙基 罗丹明B、健那绿B等5种荧光染料探针与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用．实验表明，这5 种染料探针同牛血清白蛋白结合时，疏水作用力起决定性作用，静电力起次要作用，相比之下 牛血清白蛋白(BSA)结合阴离子的能力最强，其次为中性分子，最后为阳离子．通过疏水作用 力，5种染料均是以非极性苯基进入BSA疏水性腔体中同色氨酸残基发生作用，弱氢键的形 成加强了这种作用力，且使得光谱问能量转移效率明显提高．5种染料探针的极性部位由于极 性和空间效应的原因难以进入腔体内部，致使反应均按接近1：1的方式进行． [关键词]荧光染料探针；牛血清白蛋白；荧光；反应机理 657 [中图分类号]O [学科代码]150·30[文献标识码]A 近年来选用染料作为探针，研究与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用引起了人们广泛的兴趣和关 注[1-43，但是多数研究往往侧重于结合常数、结合位点数、距离、能量转移效率等热力学数据的计算．染料 往往具有复杂的分子结构，是它们的什么部位同BSA产生了结合、结合力是什么、染料分子的电性对结 合有何影响往往因缺乏充足的证据难以搞清，而这些问题对科学研究恰恰又至关重要．为此本文选取了 在结构上相似但是又有区别的5种荧光染料作为探针，试图就以上问题给出答案，为从分子水平的角度 认识探针与蛋白质相互作用机理，为生命科学研究以及药物研究提供有用信息．这5种物质是四溴荧光 素、四氯四溴荧光素、二碘荧光素、乙基罗丹明B、健那绿B．它们的结构列于图1． 1 实验部分 1．1仪器与试剂 用仪器有限公司)；pHS-2ST数显酸度计(上海天达仪器有限公司)． 染料：Merk产品，用二次蒸馏水配制成1×10qmol／L储备溶液，使用时适当稀释；牛血清白蛋白 (BSA)：国药集团化学试剂有限公司产品，用二次蒸馏水配制成 蒸馏水． 1．2实验方法 在10 mL比色管中依次加入一定量的不同浓度的BSA溶液、染料溶液、缓冲溶液，后用二次水定 收稿日期：2011-07—19 基金项目：国家自然科学基金资助项目；山西省青年科技基金资助项目(2010021010一2)． 联系人简介：董川(1963一)。教授，博士生导师，主要从事分析化学与环保色料研究． E-J：de@sxu．edU．CTt 万方数据 130 分子科学学报 第28卷 ㈣埘妒F ◇c唧 Br，VV、廿‘ Y 人．co饼I ≮惟Br Br～弘 毽磬,COONa三，vⅥ 圈1 5种荧光染料探针的结构式 2结果与讨论 2．1染料对BSA的荧光猝灭光谱 随着染料浓度的增加，BSA的荧光逐步被猝灭．表明染料