《LC-MSMS法评价卡维地洛对人肝微粒体细胞色素P450酶5种亚型的体外抑制作用》.pdfVIP

广东药学院学报 摇 Journal of Guangdong Pharmaceutical University摇 Aug.2013,29(4) 摇 LC鄄MS/ MS法评价卡维地洛对人肝微粒体细胞 色素 P450酶5种亚型的体外抑制作用 冯才,林土生,邓继锋,戴仁科,谢水林 (华南理工大学 生物科学与工程学院,广东 广州510006) 摘要:目的 建立 LC鄄MS/ MS 法评价卡维地洛对混合人肝微粒体细胞色素 P450 酶 5 种主要亚型 (CYP1A2、2C9、2C19、2D6和3A4/ 5)的体外抑制作用情况。 方法 在混合人肝微粒体孵育体系中,分别 以非那西汀O鄄脱乙基化(CYP1A2)、双氯芬酸4忆鄄羟基化(CYP2C9)、S鄄美芬妥英4忆鄄羟基化(CYP2C19)、 右美沙芬O鄄去甲基化(CYP2D6)、咪达唑仑 1忆鄄羟基化(CYP3A4/ 5)和睾酮6茁鄄羟基化(CYP3A4/ 5)反应 作为5种P450酶亚型代谢活性的标志,用阳性抑制剂对试验体系进行验证。 建立LC鄄MS/ MS法检测各 特征性反应的代谢物生成量,并计算各阳性抑制剂与卡维地洛的IC 值。 结果 卡维地洛对人肝微粒体 50 -1 CYP3A4/ 5和CYP2D6存在不同程度的抑制作用,其IC 值分别为4.3 滋mol ·L (CYP3A4/ 5 咪达唑仑 50 -1 -1 羟基化反应)、5.6 滋mol ·L (CYP3A4/ 5 6茁鄄羟基睾酮羟基化反应)和27.2 滋mol ·L ;对其余 3 种 CYP酶亚型则无显著抑制作用。 结论建立的LC鄄MS/ MS分析方法灵敏、准确、可靠,卡维地洛对人肝微 粒体CYP3A4/ 5具有中等强度抑制作用,对CYP2D6亦存在较弱的抑制作用。 关键词:卡维地洛;细胞色素P450;LC鄄MS/ MS法;药物相互作用 中图分类号:R965摇 文献标志码:A摇 doi:10.3969/ j.issn.1006鄄8783.2013.04.016 文章编号:1006鄄8783(2013)04鄄0412鄄05 Evaluation of the inhibitory potency of carvedilol on five human liver microsome cytochrome P450 enzymes by LC鄄MS/ MS method FENG Cai,LINTusheng,DENGJifeng,DAI Renke,XIE Shuilin (School of Bioscience and Bioengineering,South China University of Technology, Guangzhou 510006, China) Abstract:Objective To evaluate the inhibitory effect of carvedilol on five cytochrome P450 enzymes (CYP1A2、2C9、2C19、2D6 and 3A4/ 5) from pooled human liver microsome as analyzed by LC鄄MS/ MS method. Methods Carvedilol was incubatedwith pooled human liver microsome,and the activity of main five isozymes was characterized by phenacetin鄄O鄄deethylation,diclofenac鄄4忆鄄