甘蔗茎的糖分积累和乙烯生物合成两个关键酶基因表达的关系.pdfVIP

甘蔗茎的糖分积累与乙烯生物合成两个关键酶基因表达的关系 摘 要 为了研究外源乙烯调控甘蔗增产增糖的分子机理，本实验以克隆到甘 氧化酶基因Gz-ACO分别作为探针，检测4个基因在甘蔗生长后期不同甘 蔗品种茎中的时空表达、乙烯利处理对其表达的影响及其与乙烯释放和糖 分积累的关系。 取得以下结果： 一、以甘蔗茎为材料，分别用异硫氰酸胍法与Trizol提取法，从蔗汁、 蔗渣和汁渣混合物匀浆中提取甘蔗茎总RNA。结果表明，从蔗汁和汁渣混 合物匀浆中提取到28S、18S和5SRNA，而蔗渣中仅提取到5SKNA；蔗 汁中提取到的mRNA，其转录水平可代表甘蔗茎mRNA的转录水平；异硫 氰酸胍法提取的蔗汁总RNA纯度和产量均优于Trizol提取法。 二、在甘蔗生长后期，400mg-L．1浓度乙烯利处理后3d，两个品种的乙烯 释放量远远高于对照，处理后7d达到最高，在以后一个月内处理的乙烯释 放量虽然有所减少，但是仍然高于对照，其中B1在21d时开始恢复到对照 水平，G17在28d恢复到对照水平。乙烯利处理明显提高了上茎段的乙烯 释放量且达到显著的差异水平。 三、在甘蔗生长后期，400mg·L4浓度乙烯利处理提高了两个品种甘蔗 的蔗糖分积累速率，表现为未成熟茎段rF在成熟茎段成熟茎段。但其 T 增糖效应因品种而异，Bl号在处理后14d即表现明显的增糖效应，以后不 断增强，28d时效应虽有所降低，但仍然持续相当高的蔗糖分：与对照相比， G17号则在处理后28d时，与对照相比增糖效应不明显，表现出抑制效应， 到处理后56d时未成熟茎段才表现出明显的增糖作用。两个品种中以未成 熟茎段的糖分增长幅度最大，达到显著差异水平。 四、Northern杂交结果表明，甘蔗生长后期， 因在对照的三个茎段中维持一个较低的水平，而对照中Sc-ACS3和 和之前，在三茎段的表达表现为：已成熟茎段正在成熟茎段未成熟茎 段； 糖分积累达到饱和之后，其表达水平刚好相反，即未成熟茎段正在 长后期和糖分积累过程中，总体上都表现为：未成熟茎段正在成熟茎段 已成熟茎段。4基因在两个品种中的表达主要存在时空和表达丰度的差 烯利处理有效提高了4基因在甘蔗各茎段尤其是未成熟茎段中的表达，表 正常水平；而卅C邸在乙烯利处理后45d仍然维持高表达水平，56d才 到对照水平。乙烯利对4基因在不同品种甘蔗茎段中表达的影响，主要表 Ⅱ 上，Bl品种在处理后14d即达到最高水平，然后较长时间维持着高水平， 而G17品种则56d才达到较高水平。4基因在茎中的表达规律与其乙烯释 放量和糖分积累效应基本一致。 关键词：甘蔗；ACC氧化酶、ACC合成酶；表达；糖分积累 ⅡI The betweenaccumulationof in relationship sugar sugarcane andtwo of keyEnzymegene expression ethylenebiosynthetic pathway ABSTRACT to Inorder the studymolecularmechanismof exogenousethyleneworking in the and to