大豆肽的制备及对小鼠免疫功能的影响.pdfVIP

大豆肽的制备及其对小鼠免疫功能的影响 摘 要 本研究旨在通过自然环境中筛选出适合豆粕液体发酵的菌株，通过响应面分析法 优化大豆肽液体发酵工艺，提高蛋白质水解度，增加发酵液中低分子多肽的含量，开 拓一条低成本大豆肽生产工艺路线。 从湛江自然环境、生长的植物和动物肠道内容物中采集样品98份，用平板透明 圈法进行初筛，从中分离出117株产蛋白酶的芽孢杆菌，其中有11株的透明圈与菌 筛选出菌株y-6产蛋白酶的能力最强，48h发酵液中的蛋白酶活力达2852IU／mL；通 过形态染色特性观察、生理生化试验和16S rDNA基因序列分析，鉴定菌株Y．6为解 淀粉芽孢杆菌(Bacillus strain amyloliquefaciensy-6)。 h、 r／rain振荡发酵6 将解淀粉芽孢杆菌Y．6按4％接种GYP培养基，32℃、180 12h、18h、24h、30h、36h、42 h，4000 h和48 r／min离心20rnin，取上清液，既 为待测粗酶液；对粗酶液进行蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、甘露聚糖酶、果胶酶等酶 活力测定；结果表明：48h的发酵液中蛋白酶活力为1072．3IU／mL，淀粉酶活力为 3．75 IU／mL，纤维素酶活力为8．35IU／mL，甘露聚糖酶活力为565．9IU／mL，无明显 的果胶酶活性。对发酵液中蛋白酶的酶学性质进行了研究，结果显示该蛋白酶为中性 蛋白酶，在pH 3环境下保存1h检测不 温度稳定性；该酶不耐受酸性环境，pH5以下易失活，pH 对酶有一定的抑制作用。 采用Minitab15．1版软件安排试验设计及试验结果统计分析，对解淀粉芽孢杆菌 值、接种量、摇床转速、温度、装液量共5个因素的主效应及交互作用进行考察，确 15个试验的响应面分析试验，对接种量、温度、摇床转速三个因素做进一步的参数 r／rain，优化参数后所得试验结果与回归模型预测吻合较好，说明所建立的回归模型 是可靠的，可以较准确地预测出大豆肽转化率；优化发酵参数后，大豆肽的转化率由 最初的63．7％提高到78．15％。 将120只小鼠随机分成三批，每批四组，每组10只；对照组饲喂基础日粮，三 d后， 个试验组分别在基础日粮中添加l％、2％、4％的自制大豆肽，饲喂小鼠21 测定免疫器官指数、血清溶菌酶、巨噬细胞吞噬功能和血清溶血素；结果表明：大豆 肽可以显著提高小鼠免疫器官指数，增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性，激发小鼠抗 鸡红细胞抗体的产生，而血清溶菌酶活性则无明显差异。 用高产蛋白酶的芽孢杆菌发酵低温豆粕制备大豆肽是完全可行的，所获得的大豆 肽含量高，对小鼠免疫功能有增强作用。 关键词：大豆肽，蛋白酶，液体发酵，免疫功能，小鼠 Ⅱ of andItsEffectsof PreparationSoybeanPeptide Mice ImmuneFunctionon Abstract The ofthis wastocarveoutalowcost routeof purpose study productionsoybean